黃芪對內(nèi)毒素致急性肺損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：觀察脂多糖(LPS)致大鼠急性肺損傷(ALI)后大鼠肺組織損傷和細(xì)胞凋亡情況；研究中藥黃芪對脂多糖所致大鼠ALI的保護(hù)作用，探討其可能的機(jī)理。方法： (一)第一部分：雄性wistar大鼠200-250克30只，根據(jù)不注射脂多糖或注射脂多糖后O．5、1、2、4h隨機(jī)分成5組，分別為空白對照組、0．5h組、1h組、2h組和4h組，每組6只。不注射脂多糖或分別在注射脂多糖后O．5h、1h、2h、4h各時(shí)點(diǎn)觀察各組呼吸頻率、作動脈

2、血?dú)夥治?，取血漿測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)值。致死后檢測肺組織濕／干(W／D)比值，電鏡觀察肺組織的超微結(jié)構(gòu)，用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記(TU№L)法和透射電鏡觀察肺泡上皮細(xì)胞凋亡情況和肺泡上皮細(xì)胞Bc卜2、Bax蛋白表達(dá)。 (二)第二部分：雄性wistar大鼠200-250克45只，隨機(jī)分成3組：NS對照組(頸外靜脈注射O．9％氯化鈉(NS)0．2ml后30分鐘注射NSO．5

3、m1)，ALI組(頸外靜脈注射脂多糖5mg／kg(約O．2m1)后30分鐘注射NSO．5m1)，黃芪組(頸外靜脈注射脂多糖5mg／kg(約O．2m1)后30分鐘注射黃芪注射液4g／kg(約0．5m1))。第一次注射后4h，分別觀察各組呼吸頻率、作動脈血?dú)夥治觯⊙獫{測TNF—Q、IL～1B值。致死后檢測肺組織濕／干(W／D)比值，電鏡觀察肺組織的超微結(jié)構(gòu)，用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記(TUNEL)法和透射電鏡觀察肺泡上皮細(xì)胞凋亡情況和肺泡上皮細(xì)

4、胞Bc卜2、Bax蛋白表達(dá)。 結(jié)果： (一)第一部分：注射LPS后各組呼吸頻率較空白對照組均顯著增快，且有明顯的肺水腫和低氧血癥。注射LPS后，血漿TNF-α、IL-1β值逐漸升高，1h組TNF-α、IL-1β值達(dá)到最高峰，此后逐漸下降；而IL一4值持續(xù)升高，均顯著高于空白對照組。電鏡顯示注射LPS后各組與空白對照組相比，均可見肺泡上皮細(xì)胞損傷，甚至胞質(zhì)內(nèi)容物脫落入肺泡腔，肺泡隔內(nèi)可見炎癥細(xì)胞浸潤等。注射LPS后，各組T

5、UNEL陽性細(xì)胞率和Bax蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞率與空白對照組相比均顯著增高。各組Bc卜2蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞率與空白對照組相比無顯著差異。 (二)第二部分：LPS注射后4小時(shí)，ALI組與NS對照組相比，呼吸頻率顯著增快，動脈血氧分壓顯著下降，W／D比值升高，血漿TNF-α、IL-1β值顯著升高。電鏡顯示從I組較NS對照組肺組織內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤較多，肺泡上皮細(xì)胞變性、空泡化。ALI組TUNEL陽性細(xì)胞率和Bax蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞率均較NS對照

6、組增多，而Bc卜2蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞率則無顯著改變。黃芪組與ALI組相比，呼吸頻率有顯著改善，動脈血氧分壓顯著升高，W／D比值顯著減輕，血漿TNF-α、IL-1β值顯著降低。電鏡顯示黃芪組較ALI組肺組織內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤相對較少，肺泡上皮細(xì)胞較完整。黃芪組TU№L陽性細(xì)胞率和Bax蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞率均較札I組有顯著減少。黃芪組Bcl—2蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞率明顯高于ALI組。 結(jié)論：1．促炎因子TNF-α、IL-1β導(dǎo)致肺組織炎癥反應(yīng)加