利拉魯肽對內(nèi)毒素致急性肺損傷小鼠的保護作用研究.pdf

1、[目的]
　　通過腹腔注射內(nèi)毒素(LPS)建立小鼠急性肺損傷(ALI)模型，觀察胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)長效類似物利拉魯肽(Liraglutide)對ALI小鼠的保護作用。
　　[方法]
　　72只SPF級BALB/c小鼠，雌雄各半，隨機分為6組（每組12只）:急性肺損傷組（LPS組）、正常對照組（C組）、利拉魯肽低濃度組（L組）、利拉魯肽中濃度組（M組）、利拉魯肽高濃度組（H組）、地塞米松陽性對照組（D組）。

2、急性肺損傷組及各藥物處理組分別以LPS15mg/Kg腹腔注射建立小鼠ALI模型，正常對照組注射PBS溶液。注射LPS后，利拉魯肽低、中、高濃度組分別腹腔注射利拉魯10ug/Kg、100ug/Kg、800ug/Kg，地塞米松組腹腔注射地塞米松5mg/Kg，急性肺損傷組腹腔注射等量的PBS溶液。然后觀察各組小鼠的一般情況;12小時后取肺組織，HE染色觀察肺組織病理變化，并進行病理評分;測定肺組織濕/干重比值(W/D);瑞-吉氏染色法計數(shù)支氣

3、管肺泡灌洗液(BALF)細胞沉渣中中性粒細胞數(shù)(PMNs);夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法測定BALFTNF-α及IL-10濃度;Western Blot法測定肺組織中NF-κB p65蛋白表達。
　　[結果]
　　1.小鼠一般情況:急性肺損傷組小鼠呼吸急促，鼠毛豎立，光澤暗淡，精神反應差，不進食，不飲水，雙眼無神，極少活動，排稀便。正常對照組小鼠呼吸平穩(wěn)，鼠毛光亮，精神狀態(tài)佳，正常進食和飲水，活動敏捷;利拉魯肽低、中

4、、高濃度組小鼠與急性肺損傷組相比，上述癥狀較輕，但組間比較無差異;與地塞米松組相比，亦無明顯差異。
　　2.肺組織病理學變化:正常對照組肺組織結構排列整齊，肺泡壁薄，肺泡腔內(nèi)清晰無出血，無炎癥細胞浸潤，肺泡間隔無增厚;急性肺損傷組肺組織結構排列紊亂，肺泡壁增寬，肺間質水腫并可見大量炎性細胞浸潤，肺泡腔內(nèi)可見出血，病理評分顯示差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);利拉魯肽低、中、高濃度組上述病理改變相對較輕，3組間比較差異無顯著性(P

5、＞0.05)，與地塞米松組相比，亦無明顯差異(P＞0.05);但均較急性肺損傷組輕(P＜0.01)。
　　3.肺組織W/D比值:與正常對照組比較，急性肺損傷組肺組織W/D顯著增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);利拉魯肽低、中、高濃度組3組間比較無明顯差異(P＞0.05)，與地塞米松組相比，亦無明顯差異(P＞0.05)，但均較急性肺損傷組降低（P＜0.01）。
　　4.BALF中性粒細胞(PMNs)計數(shù)結果:與正常對照組比

6、較，急性肺損傷組PMNs顯著增加(P＜0.01);利拉魯肽低、中、高濃度組3組間比較無明顯差異(P＞0.05)，與地塞米松組相比，亦無明顯差異(P＞0.05)，但均較急性肺損傷組減少(P＜0.01)。
　　5.ELISA結果:
　　(1) TNF-α:與正常對照組比較，急性肺損傷組TNF-α表達顯著上調(diào)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）;利拉魯肽低、中、高濃度組3組間比較無明顯差異(P＞0.05)，與地塞米松組相比，亦無明顯

7、差異(P＞0.05)，但均較急性肺損傷組表達降低（P＜0.01）。
　　(2) IL-10:與正常對照組比較，急性肺損傷組IL-10表達顯著上調(diào)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);利拉魯肽低、中、高濃度組3組間比較無明顯差異(P＞0.05)，與地塞米松組相比，亦無明顯差異(P＞0.05)，但均較急性肺損傷組表達上調(diào)（P＜0.01）。
　　6.Western Blot結果:與正常對照組比較，急性肺損傷組NF-κB表達顯著上調(diào);