辛伐他汀和利伐沙班對內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：(1)觀察辛伐他汀對內(nèi)毒素所致急性肺損傷(acute lung injury，ALI)大鼠動(dòng)脈血氧分壓以及肺泡灌洗液中TNF-α、 IL-1β、 IL-10水平的影響。(2)探討辛伐他汀對急性肺損傷肺泡灌洗液蛋白含量、肺濕/干重比、囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)體(CFTR)和claudin4、18表達(dá)的影響及其可能的機(jī)制。(3)探討利伐沙班對急性肺損傷大鼠肺泡灌洗液蛋白含量及TNF-α、 IL-1β、 IL-10水平,肺組織claudi

2、n4 mRNA、claudin18 mRNA表達(dá)的影響。
　　方法：第一部分:40只SD大鼠（雄性）隨機(jī)分為空白組、模型組、辛伐他汀低劑量組(20 mg/kg)、辛伐他汀中劑量組(40 mg/kg)、辛伐他汀高劑量組(80mg/kg);氣道內(nèi)滴注脂多糖(10 mg/kg)制備急性肺損傷模型。進(jìn)行血?dú)夥治?酶聯(lián)免疫吸附法檢測肺泡灌洗液TNF-α、 IL-1β、 IL-10,蘇木素伊紅染色觀察肺組織的病理變化。第二部分:BCA法檢測肺

3、泡灌洗液蛋白,檢測肺濕/干重比,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Q-PCR)檢測肺組織勻漿CFTR mRNA、 claudin4 mRNA、claudin18 mRNA、JNKmRNA、Jak2 mRNA表達(dá),western blot檢測肺組織及肺泡灌洗液claudin4、 claudin18蛋白水平。采用相關(guān)性分析JNK mRNA、 Jak2mRNA與CFTR mRNA、 claudin4 mRNA、 claudin18 mRNA的關(guān)系。第三部分

4、:24只SD大鼠（雄性）隨機(jī)分為空白組、模型組、利伐沙班低劑量組(0.25 mg/kg)、利伐沙班高劑量組(0.5mg/kg),氣道內(nèi)滴注脂多糖(10 mg/kg)制備急性肺損傷模型;BCA法檢測肺泡灌洗液蛋白，酶聯(lián)免疫吸附法檢測肺泡灌洗液TNF-α、IL-1β、 IL-10水平,Q-PCR檢測肺組織claudin4 mRNA、 claudin18 mRNA表達(dá),蘇木素伊紅染色觀察肺組織的病理變化。
　　結(jié)果：第一部分:(1)血氧

5、分壓(PaO2):辛伐他汀低、中劑量組PaO2較模型組高,P＜0.05。(2)炎癥因子:辛伐他汀低、中、高劑量組TNF-α較模型組相比降低,P＜0.05;辛伐他汀中、高劑量組肺泡灌洗液IL-1β較模型組降低,P＜0.05;辛伐他汀中劑量組IL-10較模型組增高,P＜0.05。(3)病理:辛伐他汀低劑量組較模型組未見明顯好轉(zhuǎn),辛伐他汀中、高劑量組的肺組織病理學(xué)改變較模型組明顯減輕,病理表現(xiàn)以肺泡隔增厚為主,炎癥細(xì)胞、肺泡腔內(nèi)出血和水腫少見

6、。第二部分:(1)辛伐他汀中、高劑量組中肺泡灌洗液蛋白水平、肺濕/干重比較模型組降低,P＜0.05。(2)辛伐他汀中、高劑量組CFTR mRNA表達(dá)較模型組高,P＜0.05。(3)辛伐他汀中、高劑量組claudin4 mRNA表達(dá)較模型組高,P＜0.05;辛伐他汀低、中、高劑量組claudin18 mRNA表達(dá)與模型組之間無顯著性差異,P＞0.05。(4)辛伐他汀中、高劑量組Jak2 mRNA、JNK mRNA表達(dá)較模型組高,P＜0.0

7、5。(5)模型組肺組織claudin4、 claudin18蛋白水平與空白組之間無明顯差異,P＞0.05;辛伐他汀高劑量組的claudin4蛋白水平較模型組高,P＜0.05;辛伐他汀低、中、高劑量組肺組織claudin18蛋白水平較模型組稍低,但無顯著性差異,P＞0.05。(6)模型組肺泡灌洗液中claudin4、 claudin18蛋白水平與空白組之間無顯著性差異,P＞0.05;辛伐他汀低、中、高劑量組肺泡灌洗液claudin4、cl

8、audin18蛋白水平較模型組降低,P＜0.05。(7)相關(guān)性分析顯示:Jak2與CFTR、claudin4顯著相關(guān),而JNK與claudin18顯著相關(guān)。第三部分:(1)利伐沙班低、高劑量組肺泡灌洗液蛋白水平較模型組降低,P＜0.05。(2)利伐沙班高劑量組TNF-α水平較模型組明顯減低,P＜0.05;利伐沙班高劑量組肺泡灌洗液IL-10較模型組增高,P＜0.05;利伐沙班低、高劑量組IL-1β水平與模型組無顯著性差異,P＞0.05。

9、(3)模型組PT時(shí)間較空白組延長,P＜0.01;利伐沙班低、高劑量組PT時(shí)間較空白組稍有延長,但無顯著性差異,P＞0.05。(4)利伐沙班高劑量組claudin4、claudin18 mRNA表達(dá)較模型組高,P＜0.05。(5)病理:利伐沙班低、高劑量組肺組織較模型組明顯好轉(zhuǎn),肺泡隔增厚、炎癥細(xì)胞浸潤較少,較少見透明膜。
　　結(jié)論：第一部分:提前給予辛伐他汀可降低急性肺損傷大鼠的TNF-α、 IL-1β，提高IL-10,改善氧合,

10、減輕肺病理,對急性肺損傷具有一定的保護(hù)作用。第二部分:(1)辛伐他汀可促進(jìn)CFTR mRNA的表達(dá)。(2)辛伐他汀可促進(jìn)JNK和Jak2 mRNA的表達(dá),促進(jìn)claudin4 mRNA表達(dá);提高肺組織claudin4蛋白水平。推測claudin4表達(dá)增加可能與Jak2通路有關(guān)。(3)辛伐他汀對claudin18 mRNA及蛋白水平未見影響。第三部分:(1)利伐沙班高劑量組減低急性肺損傷大鼠肺泡灌洗液蛋白水平,降低TNF-α,升高IL-1