補腎增膜方對 COH小鼠子宮內膜形態(tài)及整合素β3表達的影響.pdf

1、　　目的：本實驗以小鼠為研究對象,通過測定圍窗口期小鼠子宮內膜整合素β3和子宮內膜形態(tài)的表達,分析中藥補腎增膜方對小鼠子宮內膜容受性的影響。
　　方法：將昆明健康雌性未孕小鼠分成5組,空白組(K組)組為生理鹽水陰性對照組10例,模型組( M組) ( GnRHa+HMG+HCG )即GnRHa長周期促排卵方案；陽性對照組( Y組)為阿司匹林10例( GnRHa+HMG+HCG+阿司匹林)；補腎增膜方中藥低劑量實驗組( D組) 1

2、0例( GnRHa+HMG+HCG+補腎增膜方低劑量) (中藥相當于成人10倍的等效劑量 )；補腎增膜方中藥高劑量組( G組) 10例( GnRHa+HMG+HCG+補腎增膜方高劑量組) (中藥相當于成人20倍的等效劑量)。將M、Y、D、 G4 組小鼠于動情周期第3天開始,每日上午9時腹腔內注射阿拉瑞林40μ g/100g 1 次/d ,連用9天；空白組組小鼠也于動情周期第3天開始,每日上午9時腹腔內注射生理鹽水 0.2 ml 1 次/

3、d ,連用9天。于造模的同時給予小鼠灌胃,空白組每日灌胃生理鹽水 20ml/kg · d , Bid ,連續(xù)灌胃11天；模型組每日灌胃生理鹽水 20ml/kg · d , Bid ,連續(xù)灌胃11天；陽性對照組每日灌胃阿司匹林 0.75ml/35g · d , Bid ,連續(xù)灌胃11天；補腎增膜方低劑量方組每日灌胃補腎增膜方低劑量(相當于成人等效劑量的10倍), Bid ,連續(xù)灌胃11天；補腎增膜方高劑量方組 每日灌胃補腎增膜方高劑量(相

4、當于成人等效劑量的20倍), Bid ,連續(xù)灌胃11天；M、Y、D、G小鼠均于第9天腹腔內注射阿拉瑞林同時于下午6時加用HMG 40u/100g 1次；K組小鼠于第9天腹腔內注射生理鹽水的同時于下午6時加用生理鹽水 0.2 ml 腹腔注射 1次；注射HMG48 h后于下午6時給M、Y、D、G小鼠腹腔內注射HCG 100u/100g 1次；K組小鼠生理鹽水0.2 ml 腹腔注射 1次。HCG 48 h后觀察小鼠陰道,大量角化細胞出現(xiàn)說明造

5、模成功。注射HCG 48 h后第二天10時,用頸椎脫臼法處死各組小鼠,剖腹取出子宮,剔除周圍黏膜組織,將子宮上段、中段組織樣本分別保存置于無菌小瓶中用備用,無菌小瓶中放入 4% 多聚甲醛溶液對標本進行固定。使用 SP 免疫組化試驗法測定整合素β3 ,用 HE 染色法子宮內膜形態(tài)。
　　結果： 1. 在整合素的表達上空白組與中藥低劑量組比較, P=0.011 ( P<0.05 ) ,有統(tǒng)計學差異；模型組與陽性對照組比較, P=0

6、.029 ( P<0.05 ),有統(tǒng)計學差異；模型組與中藥低劑量組比較, P=0.001 ( P<0.05 ),有統(tǒng)計學差異；模型組與中藥高劑量組比較, P=0.009 ( P<0.05 ),有統(tǒng)計學差異；陽性對照組與中藥低劑量組比較, P=0.443 ,無統(tǒng)計學意義；陽性對照組與中藥高劑量組比較, P=1.000 ,無統(tǒng)計學意義；中藥高劑量組與中藥低劑量組比較, P=0.666 ,無統(tǒng)計學意義。
　　2. 在子宮內膜形態(tài)學的

7、研究中,空白組、模型組、陽性對照組、中藥高劑量組、中藥低劑量組小鼠著床期子宮內膜成熟度比較,模型組與陽性對照組、模型組與中藥低劑量組比較, P=0.020 , P=0.020 ( P<0.05 ) ,有統(tǒng)計學差異。腺體面積的比較顯示模型組與中藥低劑量組比較, t=3.9491 , P=0.0009 ( P <0.05 ) ,有統(tǒng)計學差異。腺腔面積的比較顯示：空白組與中藥低劑量組比較, t=2.6277 , P=0.0171 ( P<0

8、.05 ) ,有統(tǒng)計學差異；模型組與陽性對照組比較, t=3.0103 , P=0.0075 ( P<0.05 ) ,有統(tǒng)計學差異；模型組與中藥低劑量組比較, t=5.7298 , P=0.0000 ( P<0.05 ) ,有統(tǒng)計學差異；模型組與中藥高劑量組比較, t=3.8586,P=0.0001 ( P<0.05 ) ,有統(tǒng)計學差異。
　　結論：1.補腎增膜方和阿司匹林均可以提高控制性超排卵小鼠種植窗期子宮內膜整合素β3蛋