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1、目的:膿毒癥患者血清中的凋亡DNA水平明顯升高,其水平與膿毒癥的病死率呈正相關(guān),但是凋亡DNA在膿毒癥中的具體作用還不是很清楚。本課題以凋亡DNA為研究對象進行研究,其研究目的主要分為:(1)探究自身凋亡DNA在介導(dǎo)全身炎癥反應(yīng)中的作用及相關(guān)機制;(2)以凋亡DNA為靶點,探究治療全身炎癥反應(yīng)的新方法。
方法:(1)尾靜脈注射凋亡DNA建立實驗?zāi)P?,通過檢測小鼠血清和臟器中的細(xì)胞因子水平,探究凋亡DNA在介導(dǎo)全身炎癥反應(yīng)中的作
2、用,從而驗證凋亡DNA的致病性。在體外將凋亡DNA和巨噬細(xì)胞共孵育,通過檢測培養(yǎng)上清中的細(xì)胞因子水平,初步探究凋亡DNA的致病機制。(2)把凋亡DNA或者凋亡DNA加維生素C和巨噬細(xì)胞共同孵育,然后檢測培養(yǎng)上清中的細(xì)胞因子,并對其進行分析,從而研究維生素C在調(diào)節(jié)凋亡DNA介導(dǎo)炎癥中的作用。(3)通過給予實驗組維生素 C治療,然后觀察各組小鼠的炎癥介質(zhì)表達情況,從而分析維生素C是否能夠治療凋亡DNA介導(dǎo)的全身炎癥反應(yīng)。(4)用LPS建立膿
3、毒癥模型,然后用維生素C對膿毒癥小鼠進行治療,觀察各組小鼠的生存率,從而進一步驗證維生素 C的治療效果。
結(jié)果:(1)通過研究我們發(fā)現(xiàn):與對照組相比,實驗小鼠產(chǎn)生較重的全身炎癥反應(yīng),主要表現(xiàn)為血清、心臟、肺和肝臟中有大量炎癥介質(zhì)浸潤。(2)細(xì)胞培養(yǎng)實驗結(jié)果提示:凋亡 DNA能夠明顯激活巨噬細(xì)胞,該免疫細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子與體內(nèi)結(jié)果一致。(3)進一步的實驗表明:維生素 C能夠調(diào)節(jié)凋亡 DNA介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化,緩解凋亡DNA引起的
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