急性弛緩性麻痹病例中Ⅱ型脊髓灰質(zhì)炎疫苗病毒變異株基因特征分析.pdf

1、本文研究了Ⅱ型脊髓灰質(zhì)炎疫苗變異株的基因特征，為我國OPV/IPV使用策略、維持我國無脊髓灰質(zhì)炎狀態(tài)和全球脊髓灰質(zhì)炎的最終消滅提供科學(xué)依據(jù)。 采用PCR-RFLP和ELISA法對2000～2002年AFP病例分離到的519株脊髓灰質(zhì)炎病毒進(jìn)行型內(nèi)鑒定，選取有代表性的10株Ⅱ型脊髓灰質(zhì)炎病毒變異株進(jìn)行RNA提取，全基因組序列的測定，并進(jìn)行核苷酸和氨基酸序列的同源性分析。10株病毒分別來源于貴州省AFP聚集性病例3株(實(shí)驗(yàn)室編號為：

2、CHN4048、CHN4049和CHN4050)；山東省AFP聚集性病例2株(實(shí)驗(yàn)室編號為：CHN5382和CHN5385)；散發(fā)病例5株(實(shí)驗(yàn)室編號為：CHN5318、CHN5374、CHN6160、CHN6390和CHN6424)。 貴州省來源于AFP聚集性病例3株病毒全基因組序列完全一致，但與SabinⅢ型病毒發(fā)生重組，重組區(qū)域在3A區(qū)(nt5 343～5 353)；與疫苗株相比，Ⅱ型區(qū)域變異10個(gè)堿基，其中VPl區(qū)變異4

3、個(gè)，與SabinⅡ株核苷酸同源性為99.56％，氨基酸同源性99.34％；Ⅲ型區(qū)域變異9個(gè)堿基。山東省來源于AFP聚集性病例2株病毒全基因組序列共享16個(gè)突變位點(diǎn)，沒有發(fā)生重組，與SabinⅡ株相比，VP1區(qū)分別變異7個(gè)和4個(gè)堿基，核苷酸同源性分別為99.22％和99.56％，氨基酸同源性分別為99.0％和99.67％。來源于AFP聚集性病例的5株病毒中只有貴州省的3株中發(fā)現(xiàn)重組，因此尚無證據(jù)提示脊髓灰質(zhì)炎疫苗病毒型間重組會增加病毒的毒

4、力及傳播力。來源于散發(fā)病例的5株病毒中實(shí)驗(yàn)室編號為CHN5374、CHN6160和CHN6424的3株病毒發(fā)生重組，CHN5318和CHN6390沒有發(fā)生重組。 本研究中的10株病毒除CHN5318外，其他9株病毒在重要的減毒位點(diǎn)nt481和nt2909均發(fā)生突變。來源于AFP聚集性病例的5株病毒ELISA檢測結(jié)果為疫苗相似株，分屬于兩個(gè)不同的傳播鏈，但是共享nt481、nt2909和nt2992三個(gè)突變位點(diǎn)，這3個(gè)突變位點(diǎn)不在

5、重組區(qū)域內(nèi)，這3個(gè)突變位點(diǎn)的共同作用可能是影響病毒傳播力、導(dǎo)致發(fā)生循環(huán)的重要因素。來源于散發(fā)病例的5株病毒的ELISA檢測結(jié)果為DRV，這5株病毒只共享nt481和nt2909或nt2908兩個(gè)突變位點(diǎn)，且只有nt2909/nt2908位于結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)。比較來源于AFP聚集性病例的病毒和散發(fā)病例的病毒，nt2992位點(diǎn)的突變可能導(dǎo)致病毒抗原結(jié)構(gòu)發(fā)生二次改變，從而使發(fā)生聚集的5株病毒的ELISA檢測結(jié)果不表現(xiàn)為DRV特性。CHN5318

6、在全基因組中只有nt2908位點(diǎn)的核苷酸(A→G)發(fā)生變異，導(dǎo)致該位點(diǎn)的氨基酸發(fā)生改變(Ile→Val)，但是ELISA檢測結(jié)果是DRV，表明該位點(diǎn)的變異導(dǎo)致了病毒毒力和抗原性發(fā)生改變。 OPV在全球大多數(shù)地區(qū)的使用迅速阻斷了脊髓灰質(zhì)炎野毒的流行，為全球消滅脊髓灰質(zhì)炎的計(jì)劃做出了非常重大的貢獻(xiàn)。OPV做為一種減毒活疫苗，疫苗病毒突變導(dǎo)致的服苗者或其接觸者的麻痹早已引起專家的注意，但是OPV疫苗病毒變異所引起的循環(huán)是在消滅脊髓灰質(zhì)

7、炎的最后階段才凸顯出來的。目前世界上已經(jīng)發(fā)生數(shù)起cVDPVs事件。OPV疫苗病毒變異并導(dǎo)致的循環(huán)，給全球消滅脊髓灰質(zhì)炎的計(jì)劃帶來了新的挑戰(zhàn)。 根據(jù)社會和經(jīng)濟(jì)發(fā)展?fàn)顩r，我國仍將在一定時(shí)期內(nèi)繼續(xù)使用OPV。因此維持較高的OPV免疫覆蓋率，繼續(xù)實(shí)行國家免疫日(NIDs)和亞國家免疫日(sNIDs)，保持和提高AFP病例監(jiān)測系統(tǒng)的靈敏性，積極開展AFP病例的主動監(jiān)測，是維持無脊髓灰質(zhì)炎狀態(tài)，早期發(fā)現(xiàn)pre-VDPV、防止VDPV形成并阻