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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:用變性高效液相色譜(DHPLC)研究我國(guó)食管癌高發(fā)區(qū)林州市居民高齡食管癌患者與低齡食管癌患者中抑癌基因P53全部編碼外顯子基因突變譜的情況,比較分析兩組患者中P53基因突變的差異,了解P53在食管癌發(fā)生發(fā)展中的作用,探索食管癌發(fā)生發(fā)展的分子生物學(xué)變化。 方法:選取林州市居民70歲以上高年齡組食管癌患者30例和40歲以下低年齡組食管癌患者11例,常規(guī)提取DNA,PCR擴(kuò)增P53第2-11外顯子全部編碼區(qū)和附近的一部分非編碼區(qū)
2、。擴(kuò)增產(chǎn)物用DHPLC進(jìn)行突變的篩查。篩查出的突變樣本進(jìn)行DNA純化測(cè)序分析,測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站進(jìn)行P53突變位點(diǎn)的比對(duì)和定位,了解林州市高齡食管癌患者與低齡食管癌患者P53第2-11外顯子突變譜的情況。 結(jié)果:檢測(cè)的41例患者中,發(fā)現(xiàn)P53至少有1個(gè)外顯子基因突變的病例數(shù)為28例,突變率為68.3%(28/41)。其中高年齡組30例病例中,發(fā)現(xiàn)有突變的為19例,突變率為63.3%(19/30),低年齡組11例病例中,發(fā)現(xiàn)突
3、變的有9例,突變率為81.8%(9/11),兩者比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.232>0.05)。發(fā)現(xiàn)P53有2個(gè)外顯子基因突變的病例數(shù)為9例,突變率為22.0%(9/41)。其中高年齡組30例病例中,發(fā)現(xiàn)有2個(gè)外顯子基因突變的病例數(shù)為8例,突變率為26.7%(8/30),低年齡組11例病例中,發(fā)現(xiàn)有2個(gè)外顯子基因突變的病例數(shù)為1例,突變率為9.1%(1/11),兩者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.436>0.05)。在檢測(cè)的林州市居民P53基
4、因突變譜中,共有15種突變類型,共計(jì)59個(gè)突變位點(diǎn),其中最多的突變類型是插入堿基C,共18例;其次為C→T轉(zhuǎn)換,共7例,G→C的顛換和堿基A的缺失則都為6例。編碼區(qū)的突變類型有6種,12例,主要以A和C的缺失,以及C和T的插入為主,各有2例,共計(jì)8例,占編碼區(qū)突變類型的66.7%(4/6)。在P53基因第2-8外顯子與內(nèi)含子交界的非編碼區(qū)也發(fā)現(xiàn)大量的基因突變位點(diǎn)。 結(jié)論:P53基因突變是林州市居民食管癌發(fā)生過(guò)程中的一個(gè)發(fā)生頻率很
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