過(guò)敏性鼻炎患者外周血CD4+CXCR5+T細(xì)胞表面SLAM的變化及其調(diào)控作用的研究.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)過(guò)敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)患者外周血中CD4+CXCR5+T細(xì)胞比例及其表面分子SLAM(signaling lymphocyticactivation molecule)和下游銜接蛋白SAP(SLAM-associated protein)表達(dá)的變化，研究SLAM分子對(duì)CD4+CXCR5+T細(xì)胞的影響，初步探討SLAM在過(guò)敏性鼻炎致病過(guò)程中可能發(fā)揮的作用。
　　方法:
　　1.分離

2、人外周血單個(gè)核細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)AR患者和健康對(duì)照者外周血中CD4+CXCR5+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例。
　　2.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)AR患者和健康對(duì)照者CD4+CXCR5+T細(xì)胞表面SLAM和其下游銜接蛋白SAP的表達(dá)。同時(shí)檢測(cè)CD19+B細(xì)胞表面SLAM的表達(dá)。
　　3.ELISA法檢測(cè)AR患者和健康對(duì)照者血漿中IgE水平，分別分析AR患者CD4+CXCR5+T中SLAM和SAP表達(dá)量與血漿IgE的相關(guān)性。

3、　　4.免疫磁珠法分選人外周血中CD4+CXCR5+T細(xì)胞，分別用抗SLAM抗體和同型IgG蛋白處理，48小時(shí)后ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IL-21的水平。
　　5.ELISA法檢測(cè)AR患者和健康對(duì)照者血漿中IL-21的水平。分別分析血漿IL-21水平與CD4+CXCR5+T中SLAM、SAP表達(dá)量的相關(guān)性，以及血漿IL-21與IgE表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1.與健康對(duì)照者相比，AR患者外周血中，CD4+CXC

4、R5+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例沒(méi)有明顯差異（16.50±1.1190％ vs15.4±0.8521％）。
　　2.與健康對(duì)照者相比，AR患者CD4+CXCR5+T細(xì)胞表面SLAM以及其下游銜接蛋白SAP的表達(dá)水平都明顯降低（SLAM的平均熒光強(qiáng)度:61.81±2.937 vs51.25±2.162，P＜0.01;SAP的平均熒光強(qiáng)度:53.18±1.990 vs46.33±2.391，P＜0.05），且二者呈正相關(guān)(r=0.4

5、684，P=0.0242)。
　　3.與健康對(duì)照相比，AR患者CD19+B細(xì)胞占淋巴細(xì)胞百分比升高（7.928±0.5848％vs10.66±0.7986％，P＜0.05），但CD19+B細(xì)胞表面SLAM的表達(dá)明顯降低（SLAM的平均熒光強(qiáng)度:53.17±4.863 vs39.23±2.361，P＜0.05），CD4+CXCR5+T細(xì)胞表面SLAM與CD19+B細(xì)胞表面SLAM的表達(dá)之間無(wú)明顯相關(guān)性(r=0.0441，P=0.84

6、93)。
　　4.與健康對(duì)照相比，AR患者血漿IgE水平明顯上升（144.5±6.032 vs311.1±67.39μg/mL，P＜0.05），患者血漿IgE水平與CD4+CXCR5+T細(xì)胞中SLAM和SAP的表達(dá)量分別呈負(fù)相關(guān)(r=-0.4448，P=0.0335; r=-0.4369, P=0.0371)。
　　5.與健康對(duì)照組相比，AR患者血漿IL-21的水平顯著上升（63.93±3.809 vs86.42±5.227

7、 pg/mL，P＜0.01）。且血漿IL-21與CD4+CXCR5+T細(xì)胞上SLAM和SAP的表達(dá)量均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.3245,P=0.0360; r=-0.3805,P=0.0129)。血漿IL-21與IgE的表達(dá)呈明顯正相關(guān)(r=0.3374，P=0.0289)。
　　6.與同型IgG相比，用抗SLAM抗體刺激人外周血中CD4+CXCR5+T細(xì)胞后，培養(yǎng)上清中IL-21水平明顯降低(130.4±17.23 vs67.47±

8、9.91 pg/mL, P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.過(guò)敏性鼻炎患者外周血CD4+CXCR5+T細(xì)胞中SLAM及SAP的表達(dá)均顯著降低，且兩者呈正相關(guān);同時(shí)B細(xì)胞表面SLAM的表達(dá)也明顯降低。且CD4+CXCR5+T細(xì)胞SLAM及SAP的表達(dá)與血漿IgE水平呈負(fù)相關(guān)，能從一定程度上提示疾病狀態(tài)。
　　2.過(guò)敏性鼻炎患者血漿IL-21水平明顯高于健康對(duì)照者，并且IL-21水平與CD4+CXCR5+T細(xì)胞上SLAM