纈沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟保護(hù)作用及對(duì)腎小管鈉-氫交換蛋白3表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討纈沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟病變的保護(hù)作用，并從影響鈉/氫交換蛋白3(sodium hydrogen exchanger3，NHE3)表達(dá)的角度探討其腎臟保護(hù)機(jī)制，為糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)的預(yù)防和治療提供新的理論依據(jù)。
　　 方法：成年雄性大鼠50只，隨機(jī)分成正常對(duì)照組(NC)、糖尿病對(duì)照組(DM)、纈沙坦治療組(DV)、纈沙坦胰島素聯(lián)合治療組(DVY)和胰島素治療組(DY)。各糖尿病大

2、鼠分兩次腹腔注射1％鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)按55mg/kg劑量建立1型糖尿病大鼠模型，以血糖≥16.7mmol/L，尿糖+++～++++為成模標(biāo)準(zhǔn)。DV、DVY、DY組造模成功后每天分別給予纈沙坦30mg/kg，精蛋白鋅重組人胰島素2U/d+纈沙坦30mg/kg，精蛋白鋅重組人胰島素2U/d預(yù)防性治療，NC組與DM組分別給予等體積溶媒灌胃。治療第六周末收集大鼠血、尿標(biāo)本及取兩腎，檢測(cè)血糖(blood gluc

3、ose，BG)、腎重指數(shù)、血清肌酐(serum creatinine，Scr)、血尿素氮(bloodurea nitrogen，BUN)及24小時(shí)尿蛋白排泄量(24-hour urinary protein，24h-Upro)。腎組織蘇木素-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining，HE)及過碘酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff staining，PAS)觀察腎臟病理形態(tài)學(xué)變化，We

4、stern blot檢測(cè)腎小管NHE3蛋白水平，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)腎小管NHE3 mRNA表達(dá)變化。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均為計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P值<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1.一般情況及24小時(shí)尿蛋白排泄量：DM組大鼠腎重指數(shù)、24小時(shí)尿蛋白排泄量明顯高于NC組(P<0.01)，DV、DVY與DY組均低于DM組，以DVY組降低較為明顯(P<0.0

5、1)。2.血生化指標(biāo)：與NC組比較，各組大鼠BUN、Scr明顯增高(P<0.01)，三個(gè)治療組較DM組BUN、Scr水平降低(P<0.05)，以聯(lián)合治療組降低更為明顯(P<0.01)。3.腎臟HE及PAS染色顯示，與NC組比較，DM組大鼠可見腎小球體積增大，基底膜增厚，系膜基質(zhì)增多，PAS陽性染色物質(zhì)增多等改變，各治療組上述改變均有不同程度減輕。4.Western blot結(jié)果顯示，DM組腎小管NHE3蛋白表達(dá)明顯高于NC組(P<0.0

6、1)，三個(gè)治療組NHE3蛋白表達(dá)均低于DM組(P<0.05)，以DV、DVY組降低尤為明顯(P<0.01)。5.實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示，相對(duì)于NC組，DM組腎小管NHE3 mRNA表達(dá)量增加3.63倍，DV組增加2.57倍，DY組增加3.10倍，DVY組僅增加1.91倍。
　　 結(jié)論：1.大鼠在STZ誘導(dǎo)成糖尿病6周后，腎小管NHE3表達(dá)增加，表明NHE3參與了糖尿病。腎病的發(fā)生發(fā)展；2.纈沙坦對(duì)糖尿病腎病具有保護(hù)作用，其機(jī)