纈沙坦對糖尿病大鼠腎臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎癥反應(yīng)的抑制作用.pdf

1、目的：
　　糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病的常見并發(fā)癥，同時也是糖尿病患者死亡的一個主要原因，其發(fā)病率一直呈逐年升高趨勢，目前已成為我國導致終末期腎病的第二大因素。近年的研究認為，DN是一種慢性炎癥性疾病，但其炎癥反應(yīng)發(fā)生的原因尚未明確。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress,ERS）已被證實與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，可能在DN的炎癥反應(yīng)中起到一定作用。本研究擬通過構(gòu)建

2、糖尿病大鼠模型，探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及相關(guān)炎癥反應(yīng)在糖尿病大鼠腎臟損害中的作用及血管緊張素受體拮抗劑纈沙坦對DN大鼠腎臟中ERS及相關(guān)炎癥的影響。
　　方法：
　　34只SD雄性大鼠，隨機分為對照組（Con組，n=10只）、模型組（DM組，n=12只）、纈沙坦治療組（DM+V組，n=12只）。DM組、DM+V組大鼠腹腔注射STZ40mg/kg，制作糖尿病模型，各組大鼠給予普通飼料喂養(yǎng)，DM+V組每天用纈沙坦灌胃6周（10 mg/k

3、g），Con組及DM組只灌等量蒸餾水。實驗結(jié)束后測量大鼠體重、雙側(cè)腎臟重量，應(yīng)用免疫組化法檢測ERS標志蛋白GRP78及中性粒細胞趨化因子1（MCP-1）的蛋白表達及定位，Western blot方法檢測ERS相關(guān)蛋白P-IRE1α、JNK、P-JNK、NF-κB p65、P-NF-κB p65的蛋白表達水平，實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測腎組織中JNK、NF-κB及炎癥因子MCP-1、TNFα、IL-1βmRNA表達變化，同

4、時觀察各組大鼠24小時尿蛋白定量、血漿白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）等指標的變化。
　　結(jié)果：
　　1、與Con組相比，DM組大鼠24小時尿蛋白定量、BUN、Scr水平明顯升高（P<0.05），ALB明顯降低（P<0.05），與DM組相比，DM+V組24小時尿蛋白定量、BUN明顯降低（P<0.05），ALB明顯升高（P<0.05），Scr較DM組降低但無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；
　　2、HE染

5、色光鏡下Con組腎組織未見明顯病理改變，DM組大鼠腎小球系膜細胞增殖肥大，系膜區(qū)增寬，系膜基質(zhì)聚積,腎小球基底膜增厚，腎小管上皮細胞廣泛空泡變性，并可見炎細胞浸潤，DM+V組與DM組相比，系膜細胞增殖肥大、系膜基質(zhì)聚積、腎小管上皮細胞廣泛空泡變性均減輕；
　　3、免疫組化顯示Con組GRP78輕度表達、MCP-1幾乎無表達，與Con組相比，DM組GRP78、MCP-1表達明顯升高（P<0.05），且腎小管上皮細胞呈強陽性表達，與D

6、M組相比，DM+V組GRP78、MCP-1表達明顯降低（P<0.05）；
　　4、與Con組相比，DM組P-IRE1α、P-JNK、P-NF-κB p65蛋白表達水平明顯升高（P<0.05），與DM組相比，DM+V組P-IRE1α、P-JNK、P-NF-κB p65蛋白表達水平明顯降低（P<0.05），且P-JNK、P-NF-κB p65與P-IRE1α蛋白表達程度呈正相關(guān)（P<0.05）；
　　5、與Con組相比，DM組M

7、CP-1、IL-1β、NF-κB p65、TNFα mRNA表達明顯升高（P<0.05），與DM組相比，DM+V組MCP-1、IL-1β、NF-κB p65、TNFαmRNA表達明顯降低（P<0.05），3組間JNKmRNA表達變化無明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、DN中存在ERS的激活，活化的膜蛋白P-IRE1α可能通過激活JNK及NF-κB炎癥信號通路引起炎癥反應(yīng)；
　　2、ANGII受體拮抗劑纈沙