c-myc反義寡核苷酸對(duì)膽管癌細(xì)胞株QBC-939生長(zhǎng)及化療敏感性的影響.pdf

1、目的：通過c-myc反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染QBC-939細(xì)胞株，探討c-myc反義寡核苷酸對(duì)QBC-939細(xì)胞株細(xì)胞周期、凋亡、及化療敏感性的影響，為研究膽管癌的治療提供新的思路。 方法： 1.常規(guī)培養(yǎng)膽管癌細(xì)胞株QBC-939。 2.合成特異性靶向c-myc反義寡核苷酸(ASODN)。 3.將QBC.939接種于六孔培養(yǎng)板內(nèi)，分為8組： ①空白對(duì)照組，不加任何干預(yù)措施；②脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染對(duì)照組，僅以空白脂質(zhì)

2、體轉(zhuǎn)染；③5umol/L SODN轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染c-myc正義寡核苷酸，濃度為5umol/L；④10umol/L SODN轉(zhuǎn)染組，濃度為10umol/L，⑤15umol/L SODN轉(zhuǎn)染組，濃度為15μmol/L；⑥5umol/L ASODN轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染c-myc反義寡核苷酸，濃度為5umol/L；⑦10umol/L ASODN轉(zhuǎn)染組，濃度為10umol/L；⑧15umol/L ASODN轉(zhuǎn)染組，濃度為15umol/L。作用72小時(shí)后收集

3、各組細(xì)胞，并進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 4.免疫組化法檢測(cè)各組細(xì)胞c-myc蛋白表達(dá)變化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞的周期分布和凋亡率；MTT法檢測(cè)5-Fu(lug/ul)對(duì)各組細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率。 結(jié)果： 1.各濃度反義寡核苷酸組細(xì)胞c-myc蛋白表達(dá)減弱，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體對(duì)照組與空白對(duì)照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 2.各濃度反義寡核苷酸組G1期細(xì)胞增多、S期細(xì)胞減少，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體

4、對(duì)照組與空白對(duì)照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 3.各濃度反義寡核苷酸組細(xì)胞凋亡率增高，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體對(duì)照組與空白對(duì)照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 4.等濃度化療藥物5-Fu對(duì)各濃度反義寡核苷酸組細(xì)胞的抑制率增高，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體對(duì)照組與空白對(duì)照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論： c-myc反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染可下調(diào)c-myc蛋白的表達(dá)，阻止細(xì)胞由G1期