17-丙烯胺-17-去甲氧格爾德霉素對(duì)膽管癌細(xì)胞株QBC939生長(zhǎng)周期及凋亡的影響.pdf

1、目的：探討熱休克蛋白90(HSP90)抑制劑17-丙烯胺-17-去甲氧格爾德霉素(17-AAG)對(duì)膽管癌細(xì)胞株QBC939生長(zhǎng)的影響并對(duì)其相關(guān)機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法： 1.應(yīng)用MTT比色法觀察17-AAG對(duì)膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用； 2.用流式細(xì)胞術(shù)分析經(jīng)17-AAG處理后QBC939細(xì)胞細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的變化： 3.瑞特吉姆染色法觀察經(jīng)17-AAG處理前后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；

2、4.細(xì)胞免疫組化檢測(cè)17-AAG處理前后QBC939細(xì)胞CDK1和C-e-rbB2的表達(dá)變化。 結(jié)果： 1.17-AAG能有效的抑制QBC939細(xì)胞的增殖，并呈時(shí)間、劑量依賴性，48h半數(shù)抑制濃度(IC50)為1.0umol/L：2.用0-1.0umol/l濃度的17-AAG作用QBC939細(xì)胞36h后細(xì)胞被阻滯于G2期，從11.90％±0.78％上升到40.33％±0.91％，并伴有S期細(xì)胞減少，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<

3、0.05)； 3.經(jīng)不同濃度0、0.5、1.0、5.Oumol/117-AAG作用48h后檢測(cè)其細(xì)胞凋亡率，主要表現(xiàn)為早期凋亡分別為0.43％±0.35％、7.50％±2.59％、19.87％±5.06％、25.30％±2.85％，各實(shí)驗(yàn)組與Oumol/117-AAG組比較，細(xì)胞凋亡率的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 4.瑞特-吉姆薩染色顯示，經(jīng)17-AAG作用后QBC939細(xì)胞胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡，細(xì)胞核出現(xiàn)扭曲變形及固

4、縮，出現(xiàn)較多的多核細(xì)胞，呈細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變； 5.17-AAG處理后的CDK1和C-erbB-2的蛋白表達(dá)明顯減少，平均光密度(AOD)的差異比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。 結(jié)論： 1.HSP90抑制劑17-AAG對(duì)膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的生長(zhǎng)抑制作用； 2.17-AAG通過(guò)抑制HSP90的分子伴侶功能，下調(diào)CDK1和C-erbB2表達(dá)，從而抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和周期阻