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文檔簡介
1、目的:癌癥是一種多因素、多階段、多基因變異累積的復(fù)雜病變過程。大多數(shù)的致癌因素主要通過影響遺傳基因而發(fā)揮其作用,主要表現(xiàn)為癌基因的過度表達(dá)和抑癌基因的表達(dá)缺失。本研究主要是觀察脂質(zhì)體介導(dǎo)的c-myc反義寡核苷酸對表達(dá)FHIT基因的結(jié)腸癌細(xì)胞增殖及凋亡作用的影響,以確定多基因干預(yù)在治療治療中可能發(fā)揮的作用。 方法:用脂質(zhì)體法將重組FHIT基因PRC/CMV質(zhì)粒和空載體轉(zhuǎn)染到人類結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480,并分別轉(zhuǎn)染c-myc反義寡核苷
2、酸,用western blot法檢測細(xì)胞FHIT和c-myc的表達(dá),用MTT法分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),用AO/EB染色法和流式細(xì)胞分析技術(shù)測細(xì)胞凋亡。 結(jié)果:轉(zhuǎn)染FHIT基因后,SW480(FHIT+ SW480)細(xì)胞有明顯的FHIT蛋白的表達(dá),而轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞(FHIT- SW480)未檢測到FHIT蛋白的表達(dá)。而轉(zhuǎn)染c-myc反義寡核苷酸后,對SW480細(xì)胞c-myc的表達(dá)有明顯的抑制作用,并呈明顯的時(shí)間依賴性(p<0.01)。
3、C-myc反義寡核苷酸對FHIT+/- SW480細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用(p<0.01),但對于FHIT+ SW480細(xì)胞的抑制作用明顯強(qiáng)于FHIT- SW480細(xì)胞(p<0.01)。同時(shí),c-myc反義寡核苷酸對FHIT+/- SW480細(xì)胞的凋亡均有明顯的促進(jìn)作用,但對FHIT+ SW480細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用明顯的強(qiáng)于FHIT- SW480細(xì)胞(p<0.01)。 結(jié)論:FHIT基因在SW480細(xì)胞中表達(dá),本身不能促進(jìn)細(xì)
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