反義抑制PTTG對(duì)膽管癌細(xì)胞株VEGF表達(dá)以及化療敏感性的影響.pdf

1、第一章PTTG和VEGF蛋白在膽管癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究 目的:探討PTTG和VEGF在膽管癌中的表達(dá)相關(guān)性及其與膽管癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。 方法 應(yīng)用免疫組化技術(shù)SABC法，檢測(cè)PTTG和VEGF蛋白在36例膽管癌標(biāo)本、30例膽管癌旁組織和10例正常膽管組織中的表達(dá)。并結(jié)合臨床病理資料進(jìn)行分析。 結(jié)果:膽管癌組織和癌旁組織中PTTG蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為72.2％(26／36)和6.7％(2／30)，VEGF蛋白

2、的陽(yáng)性表達(dá)率分別為83.3％(30／36)和13.3％(4／30)；在正常膽管組織中未檢測(cè)到PTTG和VEGF蛋白的表達(dá)。膽管癌組織與癌旁組織和正常膽管組織與之間的PTTG和VEGF蛋白表達(dá)差異均有顯著性。癌組織中PTTG和VEGF蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)。經(jīng)與臨床資料比較，PTTG和VEGF蛋白表達(dá)與腫瘤是否轉(zhuǎn)移有關(guān)，但與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化無(wú)關(guān)。 結(jié)論:PTTG和VEGF蛋白在膽管癌中高表達(dá)，兩者表達(dá)呈正相關(guān)；與膽管癌

3、是否轉(zhuǎn)移有關(guān)。 第二章 反義抑制PTTG對(duì)膽管癌細(xì)胞株VEGF表達(dá)的影響 目的:探討反義抑制PTTG表達(dá)對(duì)膽管癌細(xì)胞株QBC939中VEGF表達(dá)的影響,并建立穩(wěn)定表達(dá)pcDNA3.1-PTTGas和pcDNA3.1(+)的細(xì)胞亞株。 方法:將反義PTTG真核表達(dá)載體pcDNA3.1-PTTGas按濃度梯度瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至膽管癌細(xì)胞株QBC939,培養(yǎng)48小時(shí)后檢測(cè)PTTG和VEGF的mRNA和蛋白表達(dá)量的變化,并將兩

4、者的變化做直線相關(guān)分析。用G418篩選轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞,建立并鑒定穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-PTTGas和pcDNA3.1(+)的細(xì)胞亞株。 結(jié)果:成功轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-PTTGas至QBC939;瞬時(shí)轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-PTTGas后PTTG和VEGF均在mRNA和蛋白質(zhì)兩個(gè)層面上下降,兩者下降程度呈線性相關(guān)關(guān)系。成功篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-PTTGas和pcDNA3.1(+)的細(xì)胞亞株,經(jīng)鑒定前者PTTG表達(dá)量下降