糖皮質激素受體表達水平對激素治療肺內、外源性ALI-ARDS療效的影響.pdf

1、目的：急性肺損傷(ALI)/急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是指由心源性以外的肺內外各種致病因素導致的急性進行性缺氧性呼吸衰竭。ALI/ARDS具有性質相同但程度不同的病理生理改變，嚴重的ALI或ALI的最終階段被定義為ARDS。 ALI/ARDS的病因復雜，有100多種疾病可并發(fā)ARDS。臨床上將其劃分為肺內源性ARDS和肺外源性ARDS.前者包括：肺部感染、胃內容物吸入、吸入有毒氣體等；后者包括：膿毒癥、休克、嚴重的非胸部創(chuàng)傷

2、和重癥胰腺炎等。而臨床上最常見的形式多見于膿毒癥時的內毒素損害(約40％)，其次是胃內容物誤吸引起的ALI/ARDS，占30％左右。因此，目前有關ALI/ARDS的實驗研究多采用這兩種致損傷模型，是符合臨床情況的。 糖皮質激素(GCs)是由腎上腺皮質束狀帶分泌的重要類固醇類內分泌激素，有重要的生理作用。臨床上，GCs是治療ALI/ARDS較為普遍的用藥。從理論上講，GCs具有抑制炎癥反應、減輕細胞因子對肺組織的損傷和抑制纖維化等

3、作用，故用于治療ALI/ARDS應收到很好的效果，但事實并非如此。長期以來，GCs在ALI/ARDS中的應用價值始終褒貶不一。然而，在大量的臨床實踐中，由于似乎總能從糖皮質激素治療中受益，故GCs對ALI/ARDS的治療作用一直受到不同程度的認可，但不同患者治療效果差異較大，其原因有待進一步研究。 糖皮質激素受體(GR)是受體超家族中的重要成員，也是一種典型的激素依賴性核轉錄調控因子，調控多種基因轉錄的激活和抑制，在機體的生命活

4、動中具有重要作用。由于GR是GCs生物學作用發(fā)揮的介導者，其表達水平和功能狀態(tài)必將影響組織細胞對GCs的敏感性，從而影響GCs的治療效果。許多研究指出用藥前測定GR可以作為推測GCs治療反應和確切治療方案的一個指標。 臨床上，人們發(fā)現GCs治療不同病因的ALI/ARDS的效果存在不同，但對其潛在機理尚未闡明。近年來，國內外許多研究發(fā)現ALI/ARDS也存在GCs-GR系統(tǒng)紊亂現象，這對進一步探討本病的發(fā)病機理與治療效果的關系提供

5、了重要依據。 因此，本研究復制了肺內、外源性兩種病因的ALI/ARDS的動物模型，對照比較血清中糖皮質激素的水平，外周血單型核白細胞(PBMC)上GR表達水平及糖皮質激素干預后對其表達水平的影響。探討糖皮質激素的作用機制及糖皮質激素受體的改變對疾病預后的影響，為臨床上選擇性應用糖皮質激素治療不同病因的ALI提供理論上的依據。 方法：實驗分組和模型復制：健康雄性SD大鼠96只隨機分為6組：①生理鹽水(NS)組：尾靜脈注射生

6、理鹽水0.6ml②LPS組：經尾靜脈注射LPS(8mg/kg)③HCl組：氣管內緩慢滴注HCl(pH1.8，2ml/kg)④NS+Dex組，⑤LPS+Dex組，⑥HCl+Dex組。④、⑤、⑥三組為GCs干預組。模型復制前2天腹腔注射Dex2mg/kg，1次/天，模型復制前再注射一次，計3次。各項指標測定：模型復制成功后，收集標本，進行各項指標測定。外周血單個核細胞(PBMC)上的GR水平和血清GCs濃度測定：用密度梯度離心法將收集的肝素

7、抗凝血中的外周血單個核細胞分離出來，并將細胞懸于RPMIl640培養(yǎng)基中，進行細胞計數調成所需細胞濃度。最后用靈敏度較高的3H—地塞米松(3H—DEX)放射性配體結合法測定GR水平。血清中的GCs濃度用放免法測定，按皮質醇放免試劑盒中的操作步驟進行。 病理組織學檢查：觀察模型復制后兩種肺損傷模型肺組織標本的改變，然后進行肺組織病理切片，在顯微鏡下觀察肺組織病理形態(tài)學改變并對其進行半定量評分。 結果：肺損傷生物學指標和光鏡

8、下肺組織病理評分等指標，HCl組和LPS組均高于NS組，而在兩個肺損傷模型組的比較中，除BALF蛋白含量這一指標，HCl組顯著高于LPS組以外，其它各項指標均無顯著性差異。這些指標在LPS+Dex組均顯著下降，而在HCl+Dex組，這些指標的變化卻不一致，肺病理評分未有明顯改善，肺損傷生物學三個指標的改善也均不如LPS+Dex組明顯。 與NS組比較，HCl組GR表達水平顯著下降，而LPS組雖有下降趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義。LPS

9、+Dex組的GR表達水平與GCs均明顯高于HCl+Dex組。Dex對LPS組和HCl組的GR表達水平均無明顯影響，但二者的升降趨勢是相反的；而對GCs濃度的影響二者均有顯著性差異。 結論： 1.ALI/ARDS導致機體的應激反應，使GR表達減少，引起受體水平上的腎上腺皮質功能不全，這可能是肺損傷發(fā)生發(fā)展中的一個重要環(huán)節(jié)。 2.激素干預對這兩個肺損傷模型的PBMC上的GR表達水平的影響不同，其機制可能與不同病因所致