粘附分子CD146在系統(tǒng)性血管炎臨床和發(fā)病機(jī)制中意義的研究.pdf

1、目的:研究CD146在系統(tǒng)性血管炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的血漿、外周血白細(xì)胞、腎臟及血管壁的表達(dá)情況，觀察其在臨床活動(dòng)期和緩解期的動(dòng)態(tài)變化，并分析其與臨床炎癥指標(biāo)的相關(guān)性，探討其在系統(tǒng)性血管炎發(fā)病機(jī)制中的可能作用。 方法:1.夾心ELISA方法檢測74例系統(tǒng)性血管炎[白塞病(BD)9例，大動(dòng)脈炎(TA)11例，結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎(PAN)8例，韋格納肉芽腫(WG)24例，顯微鏡下多血管炎(MPA)18例，變應(yīng)性肉芽腫性血管(

2、CSS)炎6例]和17例SLE患者可溶性CD146(sCD146)和TNF-α水平，分析其與臨床炎癥指標(biāo)和TNF-α的相關(guān)性。其中23例患者分別在活動(dòng)期和治療好轉(zhuǎn)后分別檢測以觀察sCD146的動(dòng)態(tài)變化。34例性別和年齡匹配的健康體檢者作為正常對(duì)照。 2.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測42例系統(tǒng)性血管炎(BD4例，TA9例，PAN3例，WG11例，MPA13例，CSS2例)和15例SLE患者外周血白細(xì)胞CD146的表達(dá)。其中23例患者在活動(dòng)期

3、時(shí)及治療好轉(zhuǎn)后分別進(jìn)行檢測。將檢測結(jié)果與臨床資料進(jìn)行相關(guān)性分析并觀察其動(dòng)態(tài)變化。70人次同時(shí)收集了血漿進(jìn)行sCD146的檢測。20例正常人抗凝血來源于健康體檢者。 免疫印跡方法檢測白細(xì)胞CD146蛋白的表達(dá)，RT-PCR檢測CD146mRNA的表達(dá)。培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞株VEC.304，作為蛋白和RT-PCR檢測時(shí)的陽性對(duì)照。3.HE和免疫組化染色分析11例AASV、13例LN、2例過敏性紫癜腎病和1例IgA腎病腎活檢標(biāo)本冰凍切片CD1

4、46及CD31的表達(dá)異同。其中23例同時(shí)采集了血樣進(jìn)行sCD146和外周血白細(xì)胞CD146的檢測。10例正常腎組織和10例腎癌組織作為血管的對(duì)照。另取類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜標(biāo)本5例和骨性關(guān)節(jié)炎滑膜標(biāo)本3例。 結(jié)果:1.MPA患者組血漿中，sCD146的表達(dá)較正常人明顯升高(p＜0.01)，其水平與年齡和血肌酐相關(guān)，與炎癥指標(biāo)和疾病活動(dòng)指數(shù)以及TNF-α無關(guān)；其他各組與正常人相比無差異，但TA組的水平最低?；顒?dòng)期及緩解期sCD146的水

5、平分別為334.7±123.3ng/ml和412.9±146.1ng/ml，二者之間差異有顯著性(p=0.003)。 2.首次研究發(fā)現(xiàn)AASV和SLE組活動(dòng)期外周血各類白細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞CD146的表達(dá)明顯升高，但與炎癥指標(biāo)和疾病活動(dòng)指數(shù)無關(guān)，大劑量激素和免疫抑制劑治療能使CD146的表達(dá)明顯下降。少數(shù)其他結(jié)締組織病(CTD)患者也有陽性發(fā)現(xiàn)。目前國際上尚未見報(bào)道。 3.AASV組均為新月體型腎炎Ⅲ型，SLE患者中L

6、N-Ⅲ(A)3例，合并V1例；LN-ⅣG(A)型4例，LN-ⅣS(A)型3例，LN-Ⅱ型3例。腎臟和血管CD146的染色主要位于大、中血管和部分小血管的內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞，但與CD31的表達(dá)強(qiáng)度和部位不同。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管及炎癥細(xì)胞CD146的染色基本為陰性，與血漿sCD146的水平及外周血白細(xì)胞的表達(dá)不一致。 結(jié)論:1.MPA患者sCD146的水平明顯升高，與年齡和血肌酐相關(guān)，也許反映了廣泛而嚴(yán)重的微、小血管內(nèi)皮損傷，

7、為MPA的臨床診斷提供了一個(gè)新的標(biāo)志分子；其他各組與正常人相比無差異，但TA組水平最低，提示與MPA的內(nèi)皮損傷不同。 2.CD146在系統(tǒng)性血管炎尤其是AASV和SLE活動(dòng)期外周血各類白細(xì)胞中存在激活現(xiàn)象，隨激素和免疫抑制劑治療病情好轉(zhuǎn)而轉(zhuǎn)陰，提示其在發(fā)病機(jī)制中可能起了重要的作用，并為治療提供了新的靶向。 3.外周血白細(xì)胞CD146的表達(dá)從活動(dòng)期到好轉(zhuǎn)期呈下降趨勢，而sCD146呈上升趨勢，提示二者其在發(fā)病機(jī)制中可能相互