新型超長效胰島素1316A對1型糖尿病大鼠血糖及Th細胞因子的影響.pdf

1、目的:初步探討新型超長效胰島素1316A對大鼠的降糖效果及Th因子的變化，為這一新藥物的研發(fā)、推廣、應用提供指導。
　　方法:
　　(1)大鼠分組：正常SD大鼠8只為正常對照組(A組)，1型糖尿病模型大鼠24只隨機分為模型對照組(B組)、德谷胰島素藥物對照組(C組)和新型超長效胰島素1316A實驗組(D組)。
　　(2)藥物干預：A組大鼠不做任何處理；B組皮下注射專用溶媒每日一次；C組皮下注射德谷胰島素每日一次；D組皮

2、下注射新型超長效胰島素1316A，每兩日一次；根據(jù)大鼠體重調(diào)整藥物劑量，連續(xù)6周。
　　(3)指標檢測與觀察：實驗期間觀察大鼠一般狀況，并于藥物干預前、藥物干預后3周、藥物干預后6周測大鼠的體重、空腹血糖。藥物干預6周后檢測外周血HbAc1含量(％)，光鏡下觀察胰腺組織病理變化，免疫組化檢測胰腺TNF-α；ELISA法檢測大鼠血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-17水平；流式細胞儀檢測外周血Th17細胞數(shù)量。

3、
　　結(jié)果:
　　(1)一般情況：實驗過程中D組大鼠一般狀況良好，“三多一少”癥狀得到了改善，D組大鼠體重呈現(xiàn)總體上升的趨勢，在第3周(247.00±10.73g)時體重較第2周(252.58±25.30g)輕，然后繼續(xù)上升，第4周(265.68±19.38g)及第6周(270.08±19.35g)體重顯著高于B組，與C組相比無顯著性差異；D組攝水量、進食量、排尿量均低于B組；
　　(2)大鼠血糖及糖化血紅蛋白(%)測

4、定結(jié)果：藥物干預后 D組大鼠第7天(6.85±3.78mmol/L)、21天(2.50±0.35mmol/L)、42天(8.50±9.98mmol/L)血糖值緩慢下降并呈現(xiàn)出平穩(wěn)的趨勢，均低于B組，與B組相比具有統(tǒng)計學意義。 C組與D組的糖化血紅蛋白控制7%以下，與A組相比無明顯差異；而B組的糖化血紅蛋白>9%;
　　(3)胰腺組織HE染色與TNF-α免疫組化結(jié)果：胰島素1316A干預6w后D組大鼠胰腺組織HE染色見胰島組織較為完

5、好，與A組的胰腺組織相似，且視野中胰島組織境界清晰，細胞大小正常，形態(tài)飽滿，胰島內(nèi)毛細血管豐富，胰島島內(nèi)細胞核形態(tài)基本正常；D組與 C組相比，D組胰腺病變較輕，但細胞漿較疏松，染色較淡，細胞邊界較清晰；大鼠胰腺組織TNF-α免疫組化結(jié)果D組大鼠胰腺組織中TNF-α黃染率較低。
　　(4)Th細胞因子檢測結(jié)果：
　?、貲組藥物干預6周IL-2含量(0.46±0.13ng/ml)較藥物干預前高(0.30±0.02ng/ml)，藥

6、物干預6周時D組高于B組(0.26±0.03ng/ml)；
　　②B組藥物干預6周INF-γ含量(161.03±15.98pg/ml)較藥物干預前高(142.94±9.88 pg/ml)，D組藥物干預6周(133.28±5.26pg/ml)較藥物干預前(145.80±9.51pg/ml)低，干預6周時D組低于B組；
　?、跙組藥物干預6周TNF-α含量(2.41±0.11ng/ml)較干預前高(1.70±0.12ng/ml)

7、，D組干預6周(1.31±0.06ng/ml)較藥物干預前(1.72±0.20ng/ml)低，干預6周時D組低于B組；
　?、蹹組藥物干預6周IL-10含量(1.53±0.25ng/ml)較藥物干預前(1.24±0.15ng/ml)高，干預6周時高于B組(1.08±0.22ng/ml)；
　　⑤D組藥物干預6周時IL-17含量(1.18±0.11ng/ml)低于B組(1.32±0.19ng/ml)具有差異。
　　(5)

8、Th17流式細胞檢測結(jié)果：藥物干預6周時D組Th%(0.88±0.19)低于B組(1.41±0.23)具有差異，高于A組(0.66±0.10)無明顯差異。
　　結(jié)論:
　　(1)新型超長效胰島素1316A能改善1型糖尿病大鼠“三多一少”癥狀；
　　(2)新型超長效胰島素1316A對1型糖尿病大鼠血糖、糖化血紅蛋白的控制有一定效果；
　　(3)新型超長效胰島素1316A對1型糖尿病大鼠胰腺組織胰島B細胞具有一定修復