辣根過氧化物酶-吲哚三醋酸作用于人舌鱗癌細(xì)胞Tca8113的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究.pdf

1、目的:口腔頜面部惡性腫瘤約占全身惡性腫瘤的3％,而在口腔頜面部腫瘤、囊腫及瘤樣病變中約占32.08％,雖然所占比例不高,但因其解剖部位特殊,涉及美觀和重要的生理功能,因此對患者機(jī)體和心理的影響不容忽視。無序和無休止性生長、浸潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的3個(gè)主要生物學(xué)特性。局部侵襲性是癌與非癌的基本區(qū)別。針對這些特性,目前的主要治療方法包括手術(shù)治療、化學(xué)藥物治療和放射治療,以及新興的生物治療和康復(fù)治療等。化學(xué)藥物治療作為臨床治療腫瘤的一種重要手段

2、,已得到基礎(chǔ)研究者和臨床醫(yī)生的認(rèn)可,但是其毒副作用卻不容忽視的,常見的毒副作用有骨髓抑制和胃腸道反應(yīng)等,使患者的身心承受莫大的痛苦。因此,尋找新的低毒高效的抗腫瘤藥物,在腫瘤的治療中顯得尤為重要。
　　 隨著遺傳學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展,針對腫瘤藥物的研究已逐漸由細(xì)胞毒性藥物向新型抗腫瘤藥物發(fā)展,如生長因子抑制劑、腫瘤血管生成抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑、基因工程藥物前體藥物等的研究。吲哚乙酸(IAA)作為一種植物

3、生長激素,在植物細(xì)胞分裂、生長、分化過程中起關(guān)鍵作用。辣根過氧化物酶(HRP)是一種含有激素的植物過氧化物酶,可以氧化包括吲哚乙酸在內(nèi)的一系列底物。HRP曾被用來轉(zhuǎn)變吲哚前藥IAA等類似物為有毒性的藥物,用來殺滅活體內(nèi)的細(xì)胞。IAA在人體內(nèi)有很高的耐受性,不會(huì)被哺乳動(dòng)物體內(nèi)的過氧化物酶所氧化,只有在HRP存在時(shí)才會(huì)被氧化并轉(zhuǎn)化為有毒性的物質(zhì),從而對周圍組織細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。
　　 口腔頜面部鱗狀細(xì)胞癌系口腔頜面部上皮源性惡性腫瘤

4、,占口腔頜面部惡性腫瘤90％以上,是發(fā)病率和病死率較高的惡性腫瘤之一。Tca8113舌鱗癌細(xì)胞株培養(yǎng)己較為成熟,本實(shí)驗(yàn)借此細(xì)胞株研究HRP／IAA的抗腫瘤治療效果,并希望能探討出其治療機(jī)理,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:建立人舌鱗癌Fca-8113荷瘤裸鼠模型,將荷瘤裸鼠隨機(jī)分為3組,每組8只:空白對照組(瘤內(nèi)注射無菌生理鹽水,2次／周)；陽性對照組(經(jīng)腹腔注射氟尿嘧啶,40mg／g,2次／周)；實(shí)驗(yàn)組(HRP:24mg

5、／L,IAA:2mM,各0.1ml瘤內(nèi)注射,2次／周)。實(shí)驗(yàn)時(shí)間共21天,從藥物干涉第3天起觀察各組裸鼠的腫瘤體積變化、體重變化及生命體征。第23天處死裸鼠后,取出瘤體稱重,計(jì)算抑瘤率,并進(jìn)行組織蠟塊病理切片,用免疫組織化學(xué)法檢測各組腫瘤中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和B細(xì)胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)的表達(dá)情況；解剖裸鼠內(nèi)臟取出心臟、肝臟、肺、脾臟、腎臟、睪丸等器官,采用HE染色,觀察臟器細(xì)胞形態(tài),了解藥物對臟器的毒性。
　　

6、結(jié)果:陽性對照組和實(shí)驗(yàn)組的抑瘤率分別為56.02％、49.21％,與空白組對照比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組裸鼠體重未見明顯下降,與對照組比較無明顯差異。HE病理形態(tài)學(xué)染色觀察顯示,實(shí)驗(yàn)組對裸鼠各臟器未發(fā)現(xiàn)明顯毒副作用；陽性對照組和實(shí)驗(yàn)組裸鼠腫瘤組織中的PCNA、Bcl-2的表達(dá)均低于對照組,與之比較有顯著性差異；陽性對照組和實(shí)驗(yàn)組間無明顯差異。
　　 結(jié)論:
　　 1.HRP／IAA抗腫瘤機(jī)制可能是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡(對P