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1、 目的:類胰島素生長因子-1(IGF-1)是一種潛在的促有絲分裂劑,對肌腱細胞有促進分裂增殖的作用,肌腱細胞體外培養(yǎng)成功后,將不同濃度改種生長因子作用于第二代肌腱細胞,觀察其對細胞增殖的影響并探討其量效關(guān)系。 方法:本實驗以胎齡為19天的雞胚肌腱為材料,用酶消化后,將分離的細胞用20%的胎牛血清營養(yǎng)液培養(yǎng),貼壁達80%后傳代。觀察肌腱細胞形態(tài)及生長規(guī)律。取第二代肌腱細胞接種于六孔板,分別給予不同濃度的胎牛血清,觀察血清濃度對肌腱貼
2、壁及生長的影響。取第二代肌腱細胞接種于96孔板,分別給予不同濃度的胰島素生長因子-1,分為七組,1ng組,5ng組,10ng組,50ng組,200ng組,陽性對照,陰性對照組,用MTT實驗進行比較,觀察其對肌腱生長的影響。采用瑞士-姬姆薩染色觀察不同濃度的胰島素生長因子-1對細胞增殖的影響。 結(jié)論:肌腱細胞有其生長規(guī)律,在傳代后細胞進入快速增殖階段,到第六代開始增殖速度減慢,并迅速進入老化階段。IGF-1對肌腱細胞增殖有明顯促進作用
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