喹烯酮在刺參(Apostichopus japonicus)幼參養(yǎng)殖中的安全性研究.pdf

1、刺參（Apostichopus japonicus），又稱仿刺參，屬于棘皮動物門(Echinodermata)，海參綱(Holothuroidea)，具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值。隨著刺參需求量的不斷擴(kuò)大，我國的刺參養(yǎng)殖業(yè)也迅速發(fā)展起來。但在養(yǎng)殖過程中，刺參病害、死亡現(xiàn)象頻頻發(fā)生，合理用藥顯得尤為重要。喹烯酮(quinocetone)是我國首創(chuàng)的、擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的一類新型喹噁啉類獸藥，2003年農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)其作為抗菌促生長劑應(yīng)用在豬飼料

2、中。喹烯酮對動物具有明顯的抗菌促生長作用，且具有在動物體內(nèi)代謝快、殘留少、不蓄積等優(yōu)點(diǎn)，突破了傳統(tǒng)獸藥的局限性。目前，喹烯酮廣泛地應(yīng)用在雞、鴨、豬等畜禽中，在魚類中也有應(yīng)用研究報道，但在海參中至今未見相關(guān)報道。
　　本文通過研究在刺參保苗期間，喹烯酮對幼參的生長、非特異性免疫及抗應(yīng)激能力的影響，探討了喹烯酮在刺參幼參保苗期間的使用安全性。證實(shí)了喹烯酮能導(dǎo)致刺參體內(nèi)3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）殘留，并通過研究在刺參保苗期間

3、和養(yǎng)成期間，喹烯酮及MQCA在刺參體內(nèi)的分布和消除規(guī)律，探討了喹烯酮對養(yǎng)成刺參食品安全性的影響。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，喹烯酮對刺參有明顯的促生長作用，各實(shí)驗(yàn)組刺參幼參的增重率、特定生長率和成活率均高于對照組。隨著喹烯酮濃度的增加，增重率、特定生長率和成活率都呈現(xiàn)出先升高后下降的趨勢，20 mg/kg組最高。在飼料中添加適量喹烯酮可以影響刺參幼參的免疫指標(biāo)，隨著喹烯酮濃度的增加，ACP、AKP和SOD三種酶活性呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢

4、，存在劑量效應(yīng)，20 mg/kg組的三種酶活性最高；隨著時間的延長，實(shí)驗(yàn)組三種酶活性與對照組的差異減小，50天后SOD、ACP活性接近對照組水平。實(shí)驗(yàn)表明，高濃度的喹烯酮對幼參可能產(chǎn)生一定毒性，且使其抗應(yīng)激能力變差。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，在刺參保苗期間喹烯酮的最適添加量為20 mg/kg。
　　本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了高效液相色譜法測定刺參中喹烯酮?dú)埩袅康姆椒ā悠方?jīng)乙酸乙酯提取，正己烷脫脂凈化，色譜柱為MG C18（250 mm×4.6 mm

5、，5μm），流動相為乙腈+水（45+55，V/V），在312 nm波長下進(jìn)行檢測。結(jié)果表明，在0.05μg/mL~1.00μg/mL范圍內(nèi)喹烯酮的響應(yīng)值與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為Y=5.41e+002 X+1.24e+002，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9995。在添加濃度為20~100μg/kg時，平均回收率在75.9~86.2％之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.15~6.48%之間。該方法簡便快捷，靈敏度高，重復(fù)性好，精密度和準(zhǔn)確度均達(dá)

6、到殘留分析的要求。
　　本實(shí)驗(yàn)研究了喹烯酮在刺參幼參體內(nèi)的殘留消除規(guī)律，用藥一天后，刺參幼參體內(nèi)喹烯酮的殘留量迅速達(dá)到較高濃度，表明喹烯酮在刺參體內(nèi)吸收快；隨著時間延長，各濃度組刺參體內(nèi)喹烯酮的殘留量在一定范圍內(nèi)小幅度波動，且殘留量與用藥濃度大致成正比關(guān)系。停藥兩天后，除100 mg/kg組外，其他組喹烯酮?dú)埩袅烤陀跈z出限；停藥4天后，100 mg/kg組刺參體內(nèi)喹烯酮?dú)埩袅恳驳陀跈z出限，表明停藥后喹烯酮原藥在刺參幼參體內(nèi)消除較

7、快，對養(yǎng)成刺參食品安全性無影響。
　　實(shí)驗(yàn)首次證實(shí)了喹烯酮能導(dǎo)致刺參體內(nèi)MQCA的殘留，且存在蓄積現(xiàn)象。各組刺參幼參體內(nèi)的MQCA殘留量與用藥濃度近乎成正比例關(guān)系。停藥后MQCA殘留消除緩慢，停藥46天后，刺參體內(nèi)MQCA殘留量僅略有下降；停藥246天尚沒有完全消除；停藥403天后完全消除。因此，保苗期間合理使用喹烯酮，養(yǎng)成期間不再使用，經(jīng)1年以上的養(yǎng)成期以后，MQCA是可以完全消除的，對成品刺參的食品安全性沒有影響。