櫛孔扇貝與太平洋牡蠣雌核發(fā)育二倍體的生物學(xué)特性研究.pdf

1、人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育是指利用遺傳失活的精子，與正常卵子“受精”，而后通過抑制第一卵裂使單倍體胚胎的染色體加倍從而發(fā)育成雌核發(fā)育二倍體。與傳統(tǒng)育種技術(shù)相比，由于雌核發(fā)育后代的遺傳物質(zhì)完全來源于母體，因而人工雌核發(fā)育可作為確定性別遺傳機(jī)制、基因-著絲點(diǎn)重組、基因作圖以及快速建立高純合度品系、純系和克隆的有效手段，在貝類中有著十分廣泛的應(yīng)用前景，并有望為貝類的遺傳改良提供新的技術(shù)途徑，培育出具有優(yōu)良性狀的新品種。 本研究以我國北方養(yǎng)殖的櫛

2、孔扇貝(Chlamys farreri)和太平洋牡蠣(Crassostrea gigas)為研究對象，對雌核發(fā)育二倍體的生物學(xué)特性進(jìn)行了分析。結(jié)果如下： 1、櫛孔扇貝成活與生長特性方面：利用紫外線照射精子遺傳失活方法和6-DMAP抑制第二極體的染色體加倍法，誘導(dǎo)出櫛孔扇貝的雌核發(fā)育二倍體，觀測了幼體不同時(shí)期的成活率，生長速度等生物學(xué)特性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雌核發(fā)育二倍體的卵裂率、早期胚胎成活率、D形幼蟲發(fā)生率，孵化后3d、6d、9d、1

3、2d、15d、18d的幼體成活率顯著低于對照組。在生長速度方面，在孵化后3天內(nèi)雌核發(fā)育二倍體個(gè)體大小與對照組沒有明顯差異，但在3d后顯著大于對照組。這顯示隨著致死隱性基因因純合而被自然排除，櫛孔扇貝雌核發(fā)育二倍體的生長性狀可能逐漸優(yōu)于正常個(gè)體。 2、櫛孔扇貝遺傳特性方面：利用紫外線照射精子遺傳失活方法和6-DMAP抑制第二極體的染色體加倍法，構(gòu)建了3個(gè)櫛孔扇貝雌核發(fā)育家系。采用8個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記對3個(gè)雌核發(fā)育家系進(jìn)行分析，M-C距離

4、通過子代的雜合率來計(jì)算。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)把無效等位基因考慮在內(nèi)時(shí)，所有的微衛(wèi)星位點(diǎn)符合孟德爾遺傳定律。父本基因的缺失確定了雌核發(fā)育誘導(dǎo)的100％成功率。3個(gè)家系的基因重組率是0.4-0.64，小于報(bào)道的其他種類，而平均重組率是0.53，也就是說雌核發(fā)育F1代的純合率是0.47，大約是近親交配純合率(0.25)的2倍，因此減數(shù)分裂型雌核發(fā)育是快速獲得純系的有效手段。三個(gè)家系8個(gè)位點(diǎn)的M-C距離為13-38cm。M-C距離的確定對于將來櫛孔扇貝

5、遺傳圖譜的構(gòu)建具有重要的意義。 3、太平洋牡蠣成活與生長特性方面：利用紫外線照射精子遺傳失活方法和6-DMAP抑制第二極體的染色體加倍法，誘導(dǎo)出太平洋牡蠣的雌核發(fā)育二倍體，觀測了幼體不同時(shí)期的成活率，生長速度等生物學(xué)特性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雌核發(fā)育二倍體的卵裂率、早期胚胎成活率、D形幼蟲發(fā)生率，孵化后3d、6d、9d、12d、15d、18d的幼體成活率顯著低于對照組。在生長速度方面，在孵化后6天內(nèi)雌核發(fā)育二倍體個(gè)體大小與對照組沒有明顯差