Cathepsin L在NF-κB激活和神經(jīng)興奮性毒性中的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：研究Cathepsin L在谷氨酸受體介導(dǎo)的神經(jīng)興奮性毒性中的作用及機(jī)制。
　　 方法：采用腦立體定位紋狀體內(nèi)給藥法，建立谷氨酸受體介導(dǎo)的大鼠神經(jīng)興奮性毒性的體內(nèi)模型，尼氏染色法觀察Cathepsin L抑制劑Z-FF-FMK和1-Naphthalenesulfonyl-IW-CHO(以下簡稱NaphthaCHO)對模型大鼠紋狀體神經(jīng)元的保護(hù)作用;Western Blot檢測喹啉酸(Quinolinic acid，QA)引

2、起的IκBα(inhibitor of NF-κB, alpha isoform), p-IκBα(phospho-IκB alpha)和Cathepsin L蛋白表達(dá)的時程變化;Western Blot檢測Z-FF-FMK和NaphthaCHO對模型大鼠紋狀體內(nèi)IκBα、p-IκBα變化的影響，免疫組織化學(xué)法檢測Z-FF-FMK和NaphthaCHO對模型大鼠紋狀體內(nèi)核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)激活的

3、影響;Western Blot檢測Z-FF-FMK和NaphthaCHO對凋亡相關(guān)蛋白p53、caspase-3和自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3、P62蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：本實(shí)驗成功建立了大鼠神經(jīng)興奮性毒性的體內(nèi)模型。尼氏染色結(jié)果顯示，Z-FF-FMK和NaphthaCHO給藥組與模型組相比，損傷面積顯著減小，神經(jīng)元數(shù)目顯著增多;Western Blot結(jié)果顯示，模型大鼠紋狀體內(nèi)IκBα表達(dá)下調(diào)，p-IκBα和Ca

4、thepsin L表達(dá)上調(diào);Z-FF-FMK和NaphthaCHO可對抗QA模型大鼠紋狀體中IκBα降解和磷酸化，免疫組化結(jié)果顯示Z-FF-FMK和NaphthaCHO可抑制QA模型大鼠紋狀體內(nèi)NF-κB的核轉(zhuǎn)位;Western Blot結(jié)果顯示Z-FF-FMK和NaphthaCHO可抑制QA引起的p53、caspase-3表達(dá)水平的上調(diào)、Beclin1、LC3上調(diào)以及P62的下調(diào)。
　　 結(jié)論：谷氨酸受體介導(dǎo)的神經(jīng)興奮性毒性中