血塞通注射液藥效物質(zhì)及其體內(nèi)過程研究.pdf

1、當(dāng)前，我國中醫(yī)藥基礎(chǔ)研究領(lǐng)域已經(jīng)取得舉世矚目的成就，現(xiàn)代科學(xué)理論和技術(shù)被應(yīng)用于中藥現(xiàn)代化研究，極大地促進(jìn)了現(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，使之成為我國戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)。為進(jìn)一步提升中藥產(chǎn)品的科技競(jìng)爭(zhēng)力，推進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)的國際化，使其最終進(jìn)入國際醫(yī)藥主流市場(chǎng)，必須運(yùn)用先進(jìn)的現(xiàn)代科技手段對(duì)中藥化學(xué)物質(zhì)組成、中藥藥效物質(zhì)及其作用機(jī)制、中藥多成分藥代動(dòng)力學(xué)等開展深入研究，揭示中藥的科學(xué)內(nèi)涵，科學(xué)指導(dǎo)中藥產(chǎn)品的臨床應(yīng)用。
　　血塞通注射液為三七總皂苷提取物制

2、劑，臨床廣泛用于腦血栓、腦梗塞、冠心病、心肌梗塞等心腦血管疾病的治療，并療效確切，是一種具有重大發(fā)展前景的中藥大品種。因此，本論文選擇血塞通注射液為研究載體，圍繞中藥大品種二次開發(fā)中共性關(guān)鍵科學(xué)問題，運(yùn)用多學(xué)科交叉綜合技術(shù)手段，開展中成藥化學(xué)物質(zhì)組成、藥品質(zhì)量分析方法學(xué)、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及主要成分的體內(nèi)過程等方面研究，著重探索中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、多成分藥代動(dòng)力學(xué)、中藥PK-PD研究等難點(diǎn)問題。學(xué)位論文的主要內(nèi)容及學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)如下:
　　1采

3、用HPLC-ESI-MSn定性分析方法研究血塞通注射液化學(xué)物質(zhì)組成，從中鑒定出27個(gè)皂苷類成分。
　　2以10種皂苷對(duì)照品，研究建立了27種皂苷成分的HPLC定量分析方法，對(duì)血塞通注射液中27種成分進(jìn)行了含量測(cè)定。此外，還研究建立了血塞通注射液HPLC指紋圖譜分析方法。在此基礎(chǔ)上，建立了含量測(cè)定與指紋圖譜相結(jié)合的血塞通注射液質(zhì)量分析方法，為血塞通注射液全面質(zhì)量控制提供了方法參考。
　　3研究創(chuàng)建了基于過氧化氫-魯米諾及二苯代

4、苦味?；?魯米諾化學(xué)發(fā)光體系的中藥抗氧化活性組分高通量篩選平臺(tái)，進(jìn)而評(píng)價(jià)了血塞通注射液主要化學(xué)成分的抗氧化活性。此外，還采用體外細(xì)胞模型對(duì)血塞通注射液及其主要成分的抗氧化損傷及抗缺氧損傷活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，血塞通注射液12個(gè)主要皂苷成分均具有抗氧化活性，Rg1及Rb1具有抗心肌細(xì)胞缺氧損傷活性，對(duì)心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用。
　　4采用心肌缺血大鼠模型進(jìn)一步研究血塞通注射液主要化學(xué)成分Rg1及Rb1的藥效作用。結(jié)果表明，Rg1具有顯

5、著的抗心肌缺血作用，是血塞通注射液的主要藥效成分。
　　5采用HPLC-TQMS分析技術(shù)，建立了大鼠血漿及組織中R1、Rg1、Re、Rg2、Rh1、Rc、Rb1、Rb2、 Rb3、Rd、20(S)-Rg3和20(R)-Rg312種成分的含量測(cè)定方法，進(jìn)而研究了血塞通注射液所含的這12種皂苷類成分在大鼠體內(nèi)的過程。
　　研究結(jié)果顯示，血塞通注射液藥效物質(zhì)主要分布在腎、肺、肌肉和心臟組織中，表明這些器官及組織是藥效物質(zhì)作用及累積

6、的主要部位;Rb1在大鼠血液、組織及器官中的暴露程度最大;上述12種成分在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征分為兩大類，一類是快消除型（包括R1、Rg1、Re、Rg2、 Rh1、SRg3及RRg3），另一類是慢消除型（包括Rc、Rb1、Rb2、Rb3及Rd）?？紤]到Rg1是血塞通注射液主要藥效成分，而Rb1在大鼠體內(nèi)暴露程度最大，且Rg1及Rb1分別具有快消除型和慢消除型藥動(dòng)學(xué)行為，可各自代表血塞通注射液中兩大類具不同藥動(dòng)學(xué)特點(diǎn)的皂苷成分，據(jù)此提出在

7、血塞通注射液藥代動(dòng)力學(xué)研究中擇取Rg1和Rb1作為藥代標(biāo)志物。
　　6對(duì)心肌缺血模型大鼠開展代謝組學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)了大鼠心肌缺血的特征代謝物組，建立了基于代謝組學(xué)的中藥藥效評(píng)價(jià)方法。在此基礎(chǔ)上，提出一種基于代謝組學(xué)的中藥藥效動(dòng)力學(xué)與藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究方法（即中藥PK-PD研究方法）。根據(jù)這一思路，以藥效成分Rg1作為血塞通注射液藥代標(biāo)志物，采用心肌缺血模型大鼠特征代謝物組評(píng)價(jià)藥效，開展血塞通注射液PK-PD研究。研究結(jié)果顯示，Rg1與