AsiaⅠ型FMDV滅活疫苗毒株不同宿主系傳代中VP1基因的遺傳變異研究.pdf

1、口蹄疫是由口蹄疫病毒感染偶蹄動物所引發(fā)的高度接觸性傳染病。全世界范圍內(nèi)幾乎每年都有口蹄疫暴發(fā)，所造成的直接經(jīng)濟損失巨大。口蹄疫病毒和其他RNA病毒一樣具有極高的突變率，它在傳代過程中的遺傳變異分析，是口蹄疫疫苗研制中不可或缺的環(huán)節(jié)。VP1基因是參與構(gòu)成病毒粒子的主要中和抗原位點，可以誘導(dǎo)動物機體產(chǎn)生中和抗體及其它保護(hù)性免疫反應(yīng)，VP1基因的核苷酸是四種結(jié)構(gòu)蛋白中變異率最高的。對VP1基因的分析不僅對口蹄疫病毒遺傳變異及滅活疫苗生產(chǎn)用毒株

2、的穩(wěn)定性研究具有指導(dǎo)作用，而且對口蹄疫的流行病學(xué)調(diào)查、疫源追蹤、甚至新型疫苗的研制等都具有重要意義。 AsiaⅠ型FMDV近年來在中國及亞州呈大幅上升的趨勢，原有O型單價苗已不能覆蓋當(dāng)前的疫病流行范圍。因此，迫切需要研制出O型、Asia I型二價滅活疫苗用于口蹄疫的防治。本論文擴增了經(jīng)不同宿主系(乳鼠、BHK21細(xì)胞)連傳不同代次的AsiaⅠ型-KZ/03毒株的VP1基因，命名為MF1、MF5、MF7、CF3、CF10、CF15

3、，利用DNAstar序列分析軟件對其進(jìn)行序列分析，并與目前流行毒株的VPl基因進(jìn)行分析比較，以此驗證制苗用毒株的遺傳穩(wěn)定性，為疫苗研制過程中生產(chǎn)用乳鼠毒和生產(chǎn)用細(xì)胞毒毒種傳代基數(shù)的確定提供科學(xué)依據(jù)。 結(jié)果顯示，所測6株毒株VP1基因全長633個核苷酸，編碼211個氨基酸：傳代毒株間核苷酸同源性在99.4-99.8％，推導(dǎo)氨基酸序列的同源性為98.6％-100％；與MF1相比，未發(fā)生缺失或插入現(xiàn)象。在氨基酸高變區(qū)及主要抗原位點RG