口蹄疫O型、A型雞胚化活疫苗毒株VP1基因的克隆與序列分析.pdf

1、口蹄疫是由口蹄疫病毒(footandmouthdiseasevirus，F(xiàn)MDV)感染引起的偶蹄動(dòng)物的高度接觸性傳染病，是世界上最重要的動(dòng)物傳染病之一，國(guó)際獸疫局(OIE)及我國(guó)都將該病列為A類家畜傳染病之首。研究表明，VP1基因是FMDV的主要抗原決定簇，它具有極高的變異性。本論文是在FMDV弱毒疫苗株的基礎(chǔ)上，選取了O型OE78、OE84、OR1、OR10和A型AE105、AE123、AR5、AR15各四個(gè)代次，通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)，

2、對(duì)其VP1基因進(jìn)行克隆和序列測(cè)定，利用DNAstar分析軟件進(jìn)行序列比較，觀察O型、A型疫苗株種子毒不同代次的VP1基因和生產(chǎn)種子批不同代次的VP1基因序列變化，以了解其遺傳變異規(guī)律，分析比較它與目前流行毒株VP1基因的差異，為進(jìn)一步研究VP1基因在病毒中的變異規(guī)律和利用現(xiàn)有弱毒疫苗株生產(chǎn)滅活疫苗打下基礎(chǔ)。 與GenBank中的FMDVVP1基因序列進(jìn)行比較的結(jié)果表明，8個(gè)毒株VP1基因的長(zhǎng)度都為639bp；各型4個(gè)克隆毒株之間

3、相互間差異不大，同源性O(shè)型在99.8％-100.0％，A型在98.6％-98.9％，但是O型雞胚化弱毒株與其親本牛源Akesu58和滅活苗毒種O-A-58基因核苷酸序列相差很大，同源性在80.8％-87.2％之間，氨基酸變異則要小得多，同源性在87.8％-93.0％；A型雞胚化弱毒株與其親本牛源XJ-KT-58的基因核苷酸序列差異較小，同源性在94.6％-94.9％之間。但是，由于雞胚化弱毒株在565位核苷酸之后和571位核苷酸的插入與

4、缺失，毒株之間的氨基酸同源性比核苷酸的要小，在92.3％-93.0％。 O型FMDV雞胚化弱毒株VP1蛋白在重要抗原位點(diǎn)141-160位氨基酸的變異較高，與新疆周邊國(guó)家流行毒株相差2-3個(gè)氨基酸，與近年來(lái)流行的泛亞毒株相差3個(gè)氨基酸。但另一重要抗原位點(diǎn)200-213位氨基酸幾乎沒(méi)有變異，與新疆周邊國(guó)家僅相差一個(gè)氨基酸，與近年流行的泛亞株完全相同。A型FMDV雞胚化弱毒株VP1蛋白在重要抗原位點(diǎn)141-160位氨基酸的變異較高，與