牛AsiaⅠ型口蹄疫病毒克隆純化及其滅活疫苗的研究.pdf

1、我國(guó)自1999年暴發(fā)第五次口蹄疫病流行以來(lái)，至今仍未能有效地控制口蹄疫疫情，各省區(qū)散發(fā)和區(qū)域性流行現(xiàn)象不斷出現(xiàn)，疫情形勢(shì)異常嚴(yán)峻。我國(guó)現(xiàn)行口蹄疫滅活疫苗，由于毒株型別單一，生產(chǎn)工藝相對(duì)簡(jiǎn)單落后，導(dǎo)致疫苗免疫效力低，副反應(yīng)大，對(duì)口蹄疫病的預(yù)防性較差，對(duì)現(xiàn)行口蹄疫滅活疫苗進(jìn)行生產(chǎn)工藝改進(jìn)，進(jìn)一步提高抗原純度，研制口蹄疫克隆純化滅活疫苗已變得十分必要和迫切，特對(duì)其進(jìn)行了以下研究： 1.應(yīng)用BHK21細(xì)胞通過(guò)蝕斑試驗(yàn)克隆和再次克隆牛As

2、iaⅠ型口蹄疫病毒毒株AKT03并對(duì)克隆前和第一次、第二次克隆的口蹄疫病毒毒株的細(xì)胞半數(shù)感染量(TCID50)、乳鼠半數(shù)致死量(LD50)進(jìn)行比較測(cè)定。結(jié)果表明，通過(guò)蝕斑試驗(yàn)成功的克隆了牛AsiaⅠ型口蹄疫AKT03毒株?？谔阋逜sia，Ⅰ_AKT03毒株克隆后的蝕斑形成單位(3.0×107pfu/mL)比克隆前的蝕斑形成單位(7.2×106pfu/mL)提高了4倍。克隆后口蹄疫AsiaⅠAKT03毒株的TCID50(5.5～6.5)和

3、LD50(7.78～8.43)分別比克隆前TCID50(4.37～5.75)和LD50(6.88～7.43)明顯提高，第一次克隆的毒株和第二次克隆的毒株的TCID50和LD50效價(jià)明顯提高。這給制備口蹄疫疫苗提供了優(yōu)質(zhì)的抗原。 2.應(yīng)用牛口蹄疫AsiaⅠ_AKT03克隆毒株研制牛AsiaⅠ型口蹄疫油乳劑滅活疫苗并對(duì)其物理性狀、無(wú)菌檢驗(yàn)、安全檢驗(yàn)、免疫效力檢測(cè)等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。應(yīng)用克隆毒株研制的AsiaⅠ型口蹄疫油乳劑滅活疫苗為