新口服防凍藥物組合物的藥理學(xué)研究.pdf

1、冷環(huán)境超越人體生理耐受極限時，人體作業(yè)能力降低，凍傷發(fā)生，甚至危及生命。戰(zhàn)時，凍傷的發(fā)生導(dǎo)致嚴(yán)重危害，是部隊非戰(zhàn)斗減員的主要原因之一。我國的寒區(qū)面積廣大，同時寒區(qū)不同地域近年來都面臨著緊張局勢和不穩(wěn)定因素。研發(fā)提供可在應(yīng)急狀態(tài)下用于大部隊的口服凍傷預(yù)防藥，達到避免或延緩凍傷發(fā)生的目的，對于保障和提高我軍寒區(qū)部隊的有生力量和軍事作業(yè)效率，應(yīng)對嚴(yán)寒條件下突發(fā)事件、反恐和搶險救災(zāi)等應(yīng)急任務(wù)，從容控制和扭轉(zhuǎn)戰(zhàn)時的戰(zhàn)爭局面，具有重大的軍事意義。<

2、br>　　凍傷的病理學(xué)特征主要是局部凍結(jié)-融化過程造成的血管舒縮功能異常、組織微循環(huán)障礙和凝血系統(tǒng)功能異常。低溫致使肢端散熱加劇，體溫調(diào)節(jié)中樞通過收縮微小血管減少血流量從而迅速降低肢端溫度，以達到減少散熱、維持中心體溫的目的。但此時肢端皮膚和組織會因溫度過低而遭受凍結(jié)。一方面:局部組織凍結(jié)后微、小血管管徑粗細不勻，平滑肌層腫脹斷裂，舒縮功能紊亂，持續(xù)收縮甚至關(guān)閉，血液中有形成分聚集和堆積[1]，血流瘀滯，微循環(huán)障礙初步形成。另一方面:凍

3、結(jié)后血管內(nèi)皮細胞壞死脫落[2]，內(nèi)皮對血液凝固系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)以及血小板功能的調(diào)控作用發(fā)生紊亂，導(dǎo)致凝血功能亢進，血液凝固性增高，微循環(huán)障礙進一步加重。上述兩方面的病理改變互為因果形成惡性循環(huán)，致使血栓形成，組織缺血缺氧而壞死。因此，凍傷預(yù)防藥應(yīng)具備擴張外周血管，改善微循環(huán)和凝血系統(tǒng)功能，提高肢端皮膚溫度等作用。
　　口服凍傷預(yù)防藥45號方是以妥拉唑林、山莨菪堿為主藥的西藥復(fù)方，其中妥拉唑林的作用是擴張外周血管，山莨菪堿的作用在于改

4、善人體末梢血液循環(huán)。研究資料（內(nèi)部資料）表明，45號方能夠有效地提高肢端皮溫，使肢端組織免于或延緩寒冷損傷。但是，妥拉唑林是非選擇性的α受體阻斷藥，在阻斷血管平滑肌突觸后膜α1受體發(fā)揮擴血管作用的同時，會阻斷突觸前膜α2受體引發(fā)心動過速、震顫、腎素分泌過多等不良反應(yīng)。而α1受體阻斷藥能夠選擇性阻斷α1受體，卻不影響α2受體，作用單一、靶向性突出，具有良好的應(yīng)用前景。
　　基于凍傷發(fā)生時血管收縮痙攣、局部微循環(huán)障礙和凝血異常等病理生

5、理關(guān)鍵環(huán)節(jié)，在保留口服防凍45號方中山莨菪堿的基礎(chǔ)上，本文主要的研究內(nèi)容包括:
　　1.以臨床常用的α1受體阻斷藥為研究對象，運用離體大鼠血管環(huán)模型篩選擴血管作用最強的品種與山莨菪堿組成新的藥物組合。
　　2.運用角叉菜膠誘發(fā)的小鼠尾部血栓模型研究上述兩藥的劑量配比關(guān)系（組方研究），驗證該組方對血栓形成的防治作用及其分子機制。
　　3.建立冷環(huán)境下大鼠尾部皮膚溫度模型，研究上述擬定組方在冷暴露環(huán)境下提高皮膚溫度這一藥理

6、學(xué)作用。
　　4.通過口服給藥后監(jiān)測血流動力學(xué)指標(biāo)探討新的藥物組方對心率、血壓和心功能的影響。
　　實驗結(jié)果
　　一、α1受體阻斷藥對肢端微小動脈的擴張作用
　　哌唑嗪、特拉唑嗪和多沙唑嗪三種α1受體阻斷藥都具有擴血管效應(yīng)，三種藥物對尾動脈和肢端微動脈環(huán)的擴張效應(yīng)在(0.01～10)μmol/L范圍內(nèi)具有濃度依賴性。
　　其中哌唑嗪對尾動脈和肢端微動脈擴張效應(yīng)最強，在10μmol/L濃度時最大擴張率分別為(

7、82.6±8.9)％和（82.7±11.1）％，Bliss法求得EC50值分別為0.44±0.15μmol/L和0.56±0.18μmol/L。
　　山莨菪堿對尾動脈、肢端微動脈具有擴張效應(yīng)，在10μmol/L濃度時最大擴張率分別為(29.7±7.3)％和（20.2±5.6）％
　　使用山莨菪堿(0.10～10)μmol/L預(yù)孵育離體血管環(huán)，隨山莨菪堿濃度增大，哌唑嗪的擴血管作用特征基本不變，最大舒張率僅由(82.6±8.9

8、)％變化至(92.3±4.0)％，提示山莨菪堿與哌唑嗪聯(lián)用不產(chǎn)生協(xié)同或拮抗效應(yīng)，所以我們將二者形成藥物組合進行后續(xù)組方研究。
　　新藥物的組方研究、對血栓形成的防治作用及其作用機制
　　利用角叉菜膠誘發(fā)小鼠尾部血栓形成，腹腔注射2.5mg/kg角叉菜膠的小鼠尾尖部在4～8h期間開始出現(xiàn)暗紅色血栓形成區(qū)，48h后靠近尾尖部的血栓區(qū)發(fā)生紫紺。據(jù)統(tǒng)計，48小時后，30例小鼠中有26例尾部形成血栓，成栓率86.6％，平均血栓長度24

9、.6±4.6mm。
　　在對小鼠口服預(yù)防灌胃給藥后，發(fā)現(xiàn)山莨菪堿和哌唑嗪聯(lián)用具有顯著抗血栓形成作用，與模型組相比兩藥配比各劑量組血栓長度都顯著縮短、高劑量組成栓率顯著下降，且在山莨菪堿0.8～2.5mg/kg、哌唑嗪0.07～0.6mg/kg范圍內(nèi)能夠劑量依賴性地縮短血栓長度，在山莨菪堿2.0+哌唑嗪0.6mg/kg劑量下（即配比關(guān)系10∶3）血栓長度縮短至6.9±2.7mm，成栓率下降至50.0％，抗栓效果最好，即按照山莨菪堿∶

10、哌唑嗪=10∶3的比例為最優(yōu)藥物組方。
　　凝血系統(tǒng)功能測定結(jié)果顯示，兩藥組方在凝血機制方面是通過影響外源性凝血途徑糾正角叉菜膠誘發(fā)的小鼠血液凝固性增高，而對內(nèi)源性凝血途徑無影響。
　　血小板活化標(biāo)志物和抗血小板活性物質(zhì)的檢測結(jié)果表明，兩藥組方能顯著抑制血栓素A2(TXA2)從血小板的釋放，促進內(nèi)皮細胞分泌前列環(huán)素(PGI2)，這可能是對抗血栓形成的分子機制之一。
　　纖溶系統(tǒng)功能結(jié)果表明，兩藥組方能夠顯著抑制組織型纖

11、溶酶原激活物抑制劑(PAI-1)的釋放，間接提高纖溶活性從而對抗血栓。
　　三、新的藥物組方對冷暴露大鼠尾部皮膚溫度的影響
　　山莨菪堿和哌唑嗪聯(lián)用能夠提高大鼠冷暴露240min后尾部皮膚溫度，保護組織避免或延緩凍結(jié)。
　　四、新的藥物組方對大鼠血流動力學(xué)指標(biāo)的影響
　　新組方給大鼠灌胃30min后，使用八導(dǎo)生理記錄儀測定血壓和血流動力學(xué)參數(shù)，結(jié)果與空白對照組相比，原45號方和新型防凍藥物組合對大鼠的收縮壓(SB

12、P)、舒張壓(DBP)、平均動脈壓(MABP)、左室收縮壓（LVSP）、左室內(nèi)壓上升段最大變化速率（+dp/dtmax）、心肌縮短速度最大生理值(Vpm)、心肌縮短速度最大理論值(Vmax)、左室舒張壓末期(LVEDP)、左室內(nèi)壓下降段最大變化速率（-dp/dtmax）均無明顯影響。原45號方顯著增加大鼠的心率(HR)，而山莨菪堿與哌唑嗪對HR無明顯作用。
　　結(jié)論:
　　1.哌唑嗪能夠增強調(diào)節(jié)肢端易凍部位微、小血管舒張功能

13、，改善血流，在α1受體阻斷藥中作用最強。
　　2.山莨菪堿和哌唑嗪組成的新組方能夠有效對抗血栓形成，改善微循環(huán)，劑量分別為2.0、0.6m/kg即配比關(guān)系10∶3。
　　3.新組方的抗栓作用是通過改善凝血系統(tǒng)功能、抑制血小板活化、促進血管內(nèi)皮釋放抗栓活性物質(zhì)、提高纖溶系統(tǒng)活性等途徑實現(xiàn)的。
　　4.新組方能夠提高肢端皮膚溫度，延緩凍結(jié)發(fā)生。
　　5.新組方對大鼠血壓、心臟舒張、收縮功能均無影響;尤其與原45號方加