秦艽AtNHX1基因轉(zhuǎn)化及O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、龍膽科龍膽屬植物秦艽是分布于我國西北地區(qū)的一種傳統(tǒng)中草藥，其主要次生代謝產(chǎn)物龍膽苦苷能夠治療風(fēng)濕、疼痛和潰瘍等癥。正是由于秦艽具有重要的藥用價值，它的野生種質(zhì)資源已被過渡開采，生境也受到了嚴(yán)重的破壞。 本研究的目的是通過細胞工程手段為秦艽的保護和利用提供借鑒。擬在建立再生體系的基礎(chǔ)上，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高秦艽的抗鹽性狀。利用分子生物學(xué)手段，從秦艽中分離與抗逆相關(guān)的基因。 以秦艽葉片為外植體，通過組織培養(yǎng)方法探討了秦艽離體再

2、生的條件。 采用高效液相法測定秦艽愈傷組織以及各階段體細胞胚中龍膽苦苷的含量，發(fā)現(xiàn)愈傷組織中不能檢測到龍膽苦苷，球形胚、心形胚、魚雷胚和子葉狀胚中龍膽苦苷的含量分別為0.2609％、0.3282％、0.0285％和0.8062％(干重)。 通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法將擬南芥液泡膜NaⅦ逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因.AtNHXl導(dǎo)入秦艽。將具有卡那霉素抗性的植株進行：PCR、RT-PCR以及實時定量PCR檢測。對非轉(zhuǎn)基因植株和轉(zhuǎn)基因植

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