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文檔簡介
1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文小麥組蛋白修飾酶基因及DNA甲基轉(zhuǎn)移酶基因的分離及鑒定姓名:戴艷申請學(xué)位級別:博士專業(yè):作物遺傳育種指導(dǎo)教師:孫其信倪中福20050401AbstractEpigenelicregulationisamajoraspectofgenecontrolbywhichheritablechangesingeneexpressionOCCUrwithoutanalterationinDNAsequence,whichma
2、inlyincludeshistonecode,DNAmethylation,RNAinterferenceandgenomieimprintingThestudyofepigenticsinwheatlaggedbehindInthisarticle,genesencodinghistonemodificationenzymeandDNAmethltransferasewereisolatedusingdegenerateprimer
3、PCRand/nsilicocloningThemainresultsareasfollows:1)TwohistoneacetyltransferasegenesandfourhistonedeacetylasegeneswhichbelongedtodifferenttypeswereisolatedusinginsiHcocloningandRTPCRmethod,designatedTaHATI2,TaHDI一4respecti
4、velyAminoacidsequenceanalysissuggestedthattheyallcontainedtypicalstmctruecharacteristicsofhistoneacetyltransferaseanddeacetylaseSubeellularlocalizationindicatedthatTaHAT/proteinbecameconcentratedinthenucleusandTaHD3displ
5、ayednuclearcytoplasmicdistributionToourknowledge,nogenesencodinghistoneacetyltransferaseanddeacylasehasbeenreportedinwheat2)NineSETdomainproteingenefragmentswereobtainedbydegenerateprimerPCRPhylogeneticanalysissuggestedt
6、hattheybelongedtoSU(VAR)39classSETdomainproteinInaddition,twoSETdomainproteingeneswereobtainedusinginsilicocloningandRTPCRmethod,named砌齲刀2respectivelyPhylogeneticanalysisindicatedthattheybelongedtoASHandSU(VAR)39classSET
7、domainproteinrespectively3)WeisolatedfourwheateDNAfragmentsandoneeDNAwithopenreadingframeencodingDNAmethyltransferaseanddesignatedTaMETl,TaMET2a,TaMET2b,TaCMTandTaMET3,respectivelyBLASTsearchesandphylogeneticanalysissugg
8、estedthat5cDNAsbelongedtofourclasses(Dnmtl,Dnmt2,CMTandDnmt3)ofDNAmethyltransferasegenesTaMET2aencodedaproteinof376aaandcontainedeightoftenconservedmotifscharacteristicofDNAmethyltransferaseGenomicsequenceofTaMET2awasobt
9、ainedandfoundtocontaintenintronsandelevenexons4)Expressionanalysisofthesegenesobtainedinthisarticlerevealedthattheywereexpressedindevelopingseed,duringgerminationandvariousvegetativetissues,butinquitedifferentabundanceIt
10、wasinterestingtonotethatTaMETlandTaMET3involvedinmaintenancemethylationanddenOVOmethylationwereclearlydetectedindryseedsandothergeneshadnotbeendetectedMoreoverdifferentialexpressionpatternsofthesegenesWereobservedbetween
11、wheathybridanditsparentsinleafstemandrootofjointingstage,somewereupregulatedwhilesomeothersweredownregulatedinhybrid5)OverexpressionofTaHAT/andTaHD3genesinArabidopsissuggestedthattheywerebothassociatedwithvariousdevelopm
12、entalabnormalities,mainlyincludingleafandflowerdefectwhichsuggestedthat如J刪ZYandTaHD3maybeinvolvedinageneralregulatorymechanismresponsibleforplantplasticityandvariationinnatureThisisafirstreportaboutfunctionstudyofhistone
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