殼聚糖-絲裂霉素大分子藥物共價偶聯(lián)疊氮修飾低密度脂蛋白的分子設(shè)計與合成.pdf

1、本文計劃將具有疊氮功能基團的疏水“鉚釘”插入LDL的磷脂層，對LDL進行表面功能化，進而通過高效可靠的化學(xué)反應(yīng)將大分子—藥物綴合物鍵合在LDL表面，以解決LDL負(fù)載藥物能力有限的缺點。 本文首先設(shè)計合成了帶有疊氮功能基團的疏水探針，并優(yōu)化了合成條件，采用NMR對其結(jié)構(gòu)進行了表征。接著用溫和高效的高碘酸鹽氧化法合成了具有二醛功能基團的殼聚糖衍生物(CS—CHO)，通過1H NMR譜圖確證其結(jié)構(gòu)，通過各譜峰積分面積推導(dǎo)出一種計算醛化

2、度的方法。結(jié)果顯示通過調(diào)整高碘酸鹽與糖環(huán)的摩爾比可控制聚合物的醛化度，其中最大醛化度所對應(yīng)的高碘酸鹽/糖環(huán)摩爾比為1：5。 通過溫和的西弗堿反應(yīng)將含氨基的絲裂霉素(MMC)與CS—CHO上的醛基反應(yīng)，CS—CHO的濃度和反應(yīng)時間對其反應(yīng)程度有一定的影響。產(chǎn)物經(jīng)體外透析后顯示CS—CHO與MMC濃度比為115：2(mg/mg)，反應(yīng)時間48 h，70％的MMC被截留在大分子中。而在CS—CHO分子鏈上引入丙炔?；?PA—CS—CH

3、O)后再與MMC反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)丙炔?；⑽从绊懢酆衔锱cMMC的螯合能力。 采用“Click”反應(yīng)將含炔基的PA—CS—MMC大分子—藥物綴合物與經(jīng)疊氮疏水探針標(biāo)記的N3-LDL在表面反應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)了沉淀。 為了研究“Click”反應(yīng)對沉淀生成的影響，設(shè)計N—炔丙基—香豆素—3-甲酰胺代替PA—CS—MMC作為模型藥物，探討CuSO4/抗壞血酸鈉原位還原催化體系與LDL的相容性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在相同的催化體系下，N—炔丙基—香豆

4、素—3-甲酰胺與N3-LDL反應(yīng)同樣生成沉淀，N—炔丙基—香豆素—3-甲酰胺與LDL共混則不產(chǎn)生沉淀。說明點擊化學(xué)的氧化還原體系并不是引起沉淀的主要原因。 接著用含有三唑環(huán)與疏水鏈的香豆素衍生物與LDL進行了組裝，發(fā)現(xiàn)可以得到穩(wěn)定的表面帶有熒光信號的LDL復(fù)合體，因此認(rèn)為“Click”反應(yīng)生成的三唑環(huán)也不是引起LDL沉淀的原因。這一衍生物有望用于標(biāo)記LDL。 因此本文猜測沉淀可能是“Click”反應(yīng)的放熱對LDL結(jié)構(gòu)的破