還原型谷胱甘肽對(duì)大鼠深低溫停循環(huán)腦保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的： 隨著外科、麻醉、灌注及心肌保護(hù)技術(shù)的提高，先心術(shù)后死亡率大幅度降低，如何減輕術(shù)后并發(fā)癥，特別是神經(jīng)系統(tǒng)的并發(fā)癥引起國(guó)內(nèi)外更多的關(guān)注。本研究建立大鼠常溫體外循環(huán)（cardiopulmonary bypass，CPB）及深低溫停循環(huán)（deep hypothermia circulatory arrest，DHCA）動(dòng)物模型，探討（1）大鼠CPB模型建立的可行性；（2）還原型谷胱甘肽（reduced glutathione，G

2、SH）對(duì)大鼠CPB 及DHCA的腦保護(hù)作用。 方法： 1. CPB模型的建立 1.1 常溫CPB模型建立：SD 大鼠稱重麻醉后置于操作臺(tái)上，接生理監(jiān)護(hù)儀，肛溫監(jiān)測(cè)，尾動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)血壓，右頸總動(dòng)脈作為灌注動(dòng)脈，右頸外靜脈插管至右心房進(jìn)行靜脈引流建立CPB，無(wú)血預(yù)充液15ml，轉(zhuǎn)流120min，過(guò)程中保持肛溫在30°C 左右，停CPB 后觀察30min。 1.2 DHCA模型建立：CPB 建立方法及預(yù)充液同上

3、，建立成功后降溫使肛溫降至16～18°C時(shí)停循環(huán)60min，之后升溫至30°C時(shí)停CPB，觀察30min。 2. GSH的腦保護(hù)作用研究 2.1 分組：SD（Sprague-Dawley）大鼠24 只隨機(jī)分為3組A組：常溫CPB組，轉(zhuǎn)流過(guò)程中控制溫度30°C 左右，轉(zhuǎn)流120min，停CPB 后30min 處死大鼠。 B組：DHCA組，CPB 建立后即進(jìn)行降溫至16～18°C，停循環(huán)60min，之后升溫至30°C

4、 停CPB，30min 后處死大鼠。 C組：GSH 處理組，術(shù)前兩天腹腔注射GSH100mg/kg，每日一次，手術(shù)當(dāng)日預(yù)充液中加入GSH100mg/kg，其余處理方法同B組。 2.2 檢測(cè)：操作過(guò)程中監(jiān)測(cè)生命體征及血?dú)庾兓＾D(zhuǎn)流前及轉(zhuǎn)流結(jié)束后30min 留取靜脈血檢測(cè)腦損傷標(biāo)志蛋白S-100β及神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）。大鼠處死后迅速取出腦組織，一部分用于測(cè)定腦含水量，一部分福爾馬林固定后用于病理檢測(cè)。 結(jié)

5、果： 1. 大鼠常溫CPB模型建立成功，轉(zhuǎn)流期間心率、血壓、呼吸較轉(zhuǎn)流前明顯下降（均p<0.01），CPB 結(jié)束后恢復(fù)較好，只有血壓值仍較低（74±20mmHg），與轉(zhuǎn)流前120±8 mmHg 相比p<0.01。血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示HCT 變化最為明顯，由轉(zhuǎn)流前的40±8.6％下降至轉(zhuǎn)流后的26±6.2％，其余血?dú)鈪?shù)轉(zhuǎn)流前后并無(wú)明顯差別。 2. 大鼠DHCA 動(dòng)物模型建立成功，轉(zhuǎn)流中心率、血壓均較轉(zhuǎn)流前下降（均p<0.01

6、），轉(zhuǎn)流后雖有恢復(fù)但與轉(zhuǎn)流前相比仍p<0.01。轉(zhuǎn)流中及轉(zhuǎn)流后存在呼吸性及代謝性酸中毒。 3. DHCA組病理表現(xiàn)及腦組織含水量均較常溫CPB組更為嚴(yán)重。 GSH 處理組稍輕，但與DHCA組無(wú)顯著性差別。各組術(shù)后S-100β和NSE均較術(shù)前增加，DHCA組增加最為明顯。 結(jié)論： 1. 初步建立大鼠常溫CPB 及DHCA 動(dòng)物模型，術(shù)后短期內(nèi)生命體征及血流動(dòng)力學(xué)基本穩(wěn)定。 2. DHCA 對(duì)大鼠的腦