快中子輻射岷山紅三葉愈傷組織再生體系的建立.pdf

1、論文通過對岷山紅三葉(Trifolium pratense cv.Minshan)愈傷組織的輻射誘變和誘變后愈傷組織的細胞學觀察及再生體系的建立。得到以下結論： 1、通過配合使用酒精與次氯酸鈉進行種子消毒發(fā)現(xiàn)：在不同次氯酸鈉有效氯濃度和滅菌時間組合下，滅菌效果明顯不同。有效氯濃度為2.0％，消毒時間為15min時消毒效果最佳，污染率控制在2.50％以內，浸種后對種子發(fā)芽率無顯著影響。 2、岷山紅三葉種子在MS+20g/L

2、蔗糖培養(yǎng)基上存在發(fā)芽率低，發(fā)芽時間不一致的問題。本試驗發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基蔗糖濃度對種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢影響顯著，當蔗糖濃度從20g/L降到0g/L時，發(fā)芽率從16％增加到47％，且發(fā)芽時間較為一致。 3、以生長一周無菌苗的子葉和下胚軸為外植體，獲得愈傷組織誘導的最佳培養(yǎng)基為：MS+2 mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+2％蔗糖+0.6％瓊脂，愈傷誘導率為100％。誘導出的愈傷用快中子進行輻射，輻射劑量對岷山紅三葉的愈傷組織生長有

3、明顯的抑制作用。0.1032Gy中子吸收劑量+0.1700Gy光子吸收劑量時有一半的愈傷死亡，為最佳的誘導愈傷變異的吸收劑量。輻射后的岷山紅三葉愈傷出現(xiàn)了微核、小核、核出芽、雙核、多核等細胞核畸變類型。輻射后的愈傷進行誘導分化，芽誘導最佳培養(yǎng)基為：B5+0.06 mg/L，NAA+2％蔗糖+0.6％瓊脂，每瓶可以長出2～10個芽。最佳的生根培養(yǎng)基為：1/2 MS+0.05mg/LNAA+1.5％蔗糖+0.8％瓊脂，生根率達到74％。