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文檔簡介
1、利用克隆測序技術(shù)檢測牛MC1R基因的單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)(SNP),分析該多態(tài)性與牛毛色表型關(guān)系,為遺傳育種研究提供分子生物學(xué)依據(jù),為其近緣種屬基因的進(jìn)一步研究提供理論基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)采集了天祝白牦牛、九龍牦牛、麥洼牦牛、西藏牦牛、涪陵水牛和通江黃牛共計(jì)6個(gè)品種32個(gè)個(gè)體的新鮮耳組織并提取DNA,記錄毛色表型,利用生物信息學(xué)方法對(duì)MC1R基因的序列進(jìn)行分析,主要得出以下結(jié)論: 1、本實(shí)驗(yàn)測定的牛MC1R基因,擴(kuò)增片段全長1045bp,包
2、含了完整的CDS區(qū)序列954bp,編碼318個(gè)氨基酸,T、C、A、G的平均含量分別為22.9%(22.7%~23.1%)、35.8%(35.6%~36.0%)、15.0%(14.9%~15.2%)、26.3%(26.2%~26.4%)。A+T含量為37.9%,G+C含量為62.1%,A+T含量低于G+C的含量; 2、在牛MC1R基因編碼區(qū)序列954個(gè)位點(diǎn)中共檢測到23個(gè)多態(tài)位點(diǎn),占總的分析位點(diǎn)的2.41%,包括3個(gè)顛換(13.0
3、4%),19個(gè)轉(zhuǎn)換(82.61%),1個(gè)缺失(4.35%)。七個(gè)跨膜功能域各自存在變異位點(diǎn)。其中單一多態(tài)位點(diǎn)(Singletonpolymorphicsites)20個(gè),占86.96%;簡約信息位點(diǎn)(Parsimonyinformativepolymorphicsites)2個(gè),占8.69%;缺失1個(gè),占4.35%。其中有12個(gè)位點(diǎn)的變異發(fā)生在密碼子的第一位點(diǎn),7個(gè)位點(diǎn)的變異發(fā)生在密碼子的第二位點(diǎn),4個(gè)位點(diǎn)的變異發(fā)生在密碼子的第一位點(diǎn);
4、 3、在32個(gè)個(gè)體中共發(fā)現(xiàn)14種單倍型,24個(gè)個(gè)體表現(xiàn)為純合子基因型,8個(gè)個(gè)體表現(xiàn)為雜合子基因型; 4、發(fā)現(xiàn)牛MC1R編碼區(qū)126處存在一處特殊的SNP(單核苷酸多態(tài)性),我們所測6個(gè)品種32頭牛此位置都為C,而GenBank注冊(cè)的外國牛種(荷斯坦奶牛AF445641、AF445642、AF445646、NM174108)的序列為T: 5、MC1R基因序列具有多態(tài)性,表現(xiàn)為4種等位基因:已見報(bào)道的E+,e和本研究
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