骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的卵巢損傷大鼠卵巢功能的影響.pdf

1、本文主要探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）移植對(duì)環(huán)磷酰胺（CTX）誘導(dǎo)的大鼠卵巢損傷的影響。
　　方法：
　　采用CTX連續(xù)腹腔注射（首負(fù)荷50mg/kg,之后按10mg/kg.d連續(xù)腹腔注射14天)誘導(dǎo)大鼠卵巢損傷，每日8時(shí)取陰道脫落細(xì)胞檢查，觀察大鼠動(dòng)情周期變化來建立卵巢損傷模型。
　　取出生14天的SD大鼠的骨髓進(jìn)行原代培養(yǎng)BMSC，傳代擴(kuò)增及鑒定，獲取第3-6代細(xì)胞進(jìn)行移植。
　　將要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的大鼠分成為三

2、個(gè)組。包括空白對(duì)照組，模型組及細(xì)胞移植組?？瞻讓?duì)照組的處理方法是每次應(yīng)用生理鹽水1ml進(jìn)行腹腔注射，每天注射一次，共用15天。模型組：于第一天給予負(fù)荷劑量CTX腹腔注射，即50mg/kg溶于1ml生理鹽水中，之后按10mg/kg.d溶于1ml生理鹽水中，繼續(xù)給藥14天。細(xì)胞移植組按模型組給藥方法，但在第一天給藥后24小時(shí)左右給予尾靜脈移植BMSC，移植細(xì)胞量約為5×106/0.5ml。在停止給藥后1周處死所有動(dòng)物。心臟取血后采用放射免疫

3、法檢測(cè)血清E2，F(xiàn)SH及LH水平，收集各組卵巢組織進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　(1)與空白對(duì)照組對(duì)比，模型組和細(xì)胞移植組的雌二醇（E2）均下降（P<0.05），黃體生成素（LH）均升高（P<0.05），模型組卵泡刺激素（FSH）升高（P<0.05），但細(xì)胞移植組的FSH無明顯改變（P>0.05）；與模型組對(duì)比，細(xì)胞移植組的E2顯著升高，F(xiàn)SH及LH顯著下降（P<0.05）；
　　（2）與空白對(duì)照組比較，模型組及細(xì)胞移植

4、組總卵泡數(shù)量下降（P<0.05），以中大卵泡數(shù)下降為主（P<0.05），但是細(xì)胞移植組總卵泡數(shù)及中大卵泡數(shù)較模型組顯著增加（P<0.05），
　?。?）卵巢組織TUNEL法檢測(cè)模型組及細(xì)胞移植組AI較空白對(duì)照組增加（P<0.05），但是細(xì)胞移植組AI較模型組顯著下降（P<0.05）；
　?。?）免疫組織化學(xué)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中存在Bax及Bcl-2蛋白表達(dá)，空白對(duì)照組的卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中散在表達(dá)Bax蛋白；模型組卵泡

5、顆粒細(xì)胞質(zhì)中Bax蛋白的表達(dá)顯著增加，尤其是在閉鎖卵泡中；細(xì)胞移植組卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中Bax蛋白的表達(dá)范圍明顯小于模型組?？瞻讓?duì)照組Bcl-2蛋白在卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá)顯著，模型組Bcl-2蛋白在卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中很散在表達(dá)，細(xì)胞移植組Bcl-2蛋白表達(dá)范圍明顯大于模型組；
　?。?）免疫印記法進(jìn)行半定量檢測(cè)結(jié)果提示模型組及細(xì)胞移植組較空白對(duì)照組的卵巢組織Bax蛋白表達(dá)量顯著升高（P<0.05），Bcl-2蛋白表達(dá)量顯著下降（P