脂肪酶誘變馴化與干燥方法對(duì)催化合成環(huán)十五內(nèi)酯的影響.pdf

1、環(huán)十五內(nèi)酯是一種重要的巨環(huán)麝香，它廣泛應(yīng)用于香水、香精、化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。利用生物催化合成大環(huán)內(nèi)酯是香料領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。 實(shí)驗(yàn)以15-羥基十五烷酸甲酯為底物，以實(shí)驗(yàn)室制備的脂肪酶為催化劑合成環(huán)十五內(nèi)酯。研究?jī)?nèi)容主要有三方面：(1)紫外誘變菌株產(chǎn)脂肪酶條件的探討；(2)干燥方法對(duì)脂肪酶活性以及催化特性研究；(3)脂肪酶溫度馴化。取得研究主要結(jié)果如下： 1．經(jīng)過(guò)紫外誘變Candida spGXU08菌株的最高酶活

2、有24.5U/mL，比未經(jīng)紫外誘導(dǎo)的原始菌株活性提高33.2％。實(shí)驗(yàn)探討了PH值、溫度對(duì)脂肪酶的水解活力，PH值、溫度對(duì)脂肪酶的酶活穩(wěn)定性以及發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)間對(duì)所產(chǎn)脂肪酶的影響。 2．采用冷凍干燥法，真空干燥法，N<,2>吹干法對(duì)脂肪酶進(jìn)行干燥，結(jié)果表明：冷凍干燥法的干燥效果略好于真空干燥法，而N<,2>吹干法干燥出來(lái)的酶粉干燥并不徹底，效果沒(méi)有前兩種干燥效果好，干燥后的酶活剩余率為63.9％，低于冷凍干燥法78.74％和真空

3、干燥法75％；用真空干燥法得到的酶粉對(duì)底物的轉(zhuǎn)化率有2.06％，冷凍干燥法制得的酶粉對(duì)底物的轉(zhuǎn)化率有2.21％，兩者相差不大，而N<,2>吹干法對(duì)的轉(zhuǎn)化率對(duì)底物的轉(zhuǎn)化率僅為0.95％。 3．探討了脂肪酶溫度的馴化，結(jié)果指出：無(wú)論是種子液還是發(fā)酵液在經(jīng)過(guò)7次的重復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)后，發(fā)酵溫度逐漸改變均可以使發(fā)酵液對(duì)溫度的耐受性有一定提高。將三種發(fā)酵液：加入程序控制升溫種子液后再進(jìn)行程序控制升溫的發(fā)酵液，加入程序控制升溫種子液后恒溫發(fā)酵的發(fā)