外源性枯草芽孢桿菌在水體和斑馬魚腸道的定植情況及其對所處環(huán)境菌群的影響.pdf

1、益生菌的適應(yīng)性對其在養(yǎng)殖水體和魚類腸道中的存活和定植以及生物調(diào)控功能的發(fā)揮具有重要意義。芽孢桿菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖中被廣泛應(yīng)用的益生菌，然而它在養(yǎng)殖水體和魚類腸道中的生存動(dòng)態(tài)以及影響仍然不清楚。在這項(xiàng)研究中，我們采用帶有綠色熒光蛋白標(biāo)記基因的載體pGFP315導(dǎo)入來自草魚腸道的枯草芽孢桿菌并篩選出實(shí)驗(yàn)用菌Bst51，先將重組細(xì)菌投入設(shè)計(jì)好的實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖水體中并進(jìn)行定時(shí)取樣測定各項(xiàng)水質(zhì)指標(biāo)，然后采用細(xì)菌計(jì)數(shù)、熒光顯微鏡觀察、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-變性凝膠梯

2、度電泳等方法探究外源性枯草芽孢桿菌在水體和斑馬魚腸道中的定植情況以及對其中菌群的影響。結(jié)果表明:
　　(1)通過構(gòu)建帶有綠色熒光蛋白標(biāo)記技術(shù)以及進(jìn)一步的篩選和馴化，我們得到了用于本次實(shí)驗(yàn)的枯草芽孢桿菌重組菌株Bst51;
　　(2)通過測定溶氧量(DO)、 pH、總氮、總磷、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和氨氮等水質(zhì)指標(biāo)并進(jìn)行顯著性分析發(fā)現(xiàn)，本研究所獲得的枯草芽孢桿菌Bst51菌株在改善水質(zhì)方面效果并不明顯，除了長期影響總氮指標(biāo)和短期內(nèi)影

3、響DO值和亞硝態(tài)氮指標(biāo)外對其余指標(biāo)并無顯著影響。
　　(3)細(xì)菌計(jì)數(shù)和斑馬魚消化道各部分樣品切片的熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示，在只施用一次時(shí)，水體中Bst51的濃度下降到初始濃度的1/10并于24h后保持穩(wěn)定，證明Bst51菌株在濃度高于103 CFU/mL時(shí)能在養(yǎng)殖水體中存活。經(jīng)過一次飼喂后斑馬魚腸道中Bst51細(xì)胞的濃度有小幅下降并最終保持在5×106 CFU/g左右，證明Bst51細(xì)胞在濃度高于109 CFU/mL時(shí)能在斑馬魚腸