特異性c-myc siRNA對HL-60細(xì)胞的抑制作用.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文特異性c-myc siRNA對HL-60細(xì)胞的抑制作用姓名：趙小強(qiáng)申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液內(nèi)科）指導(dǎo)教師：孫玲20060509鄭卅I 大學(xué)2 0 哂屆碩士畢業(yè)論文 特異性c 棚y c s i R N A 對H L 6 0 細(xì)胞的抑制作用亡率；凋亡的原位酶標(biāo)記技術(shù)( T u N E L 技術(shù)) 檢測細(xì)胞的凋亡情況。4 ．應(yīng)用S P S s l O ．0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)

2、準(zhǔn)差f ；±s1表示。兩樣本均數(shù)的比較采用獨(dú)立樣本的T 檢驗(yàn)，多樣本均數(shù)的比較采用方差分析。以a = O ．0 5 作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)果：1 ．c ．m y c ．s i 砌叮A 對H L - 6 0 細(xì)胞的增殖抑制作用 M T T 法檢測結(jié)果顯示： 1 0 ，5 0 ，1 0 0 ，2 0 0 n m o l ／Lc ．m y c _ s i R N A 轉(zhuǎn)染細(xì)胞4 8h 后，H L 6 0 細(xì)胞增值活性明顯受抑，與相同濃度對

3、照組比較，對細(xì)胞增殖的抑制作用除濃度為1 0 n m o l ／L 組無顯著性差異外( P > 0 ．0 5 ) ，其余各組均具有顯著性差異( P0 ．0 5 ) 。采用1 0 0 n m o l ／Lc ．m y c ．s i R N A 轉(zhuǎn)染細(xì)胞，每2 4 h 檢測各組細(xì)胞，連續(xù)檢測7 2 h ，c - m y c —s i R N A 對H L 6 0 細(xì)胞的增殖抑制作用隨作用時(shí)間延長而增強(qiáng)，與相同濃度對照組比較，均具有顯著

4、性差異( 尸℃0 ．0 1 ) ，4 8 h 與7 2 h 對H L 6 0細(xì)胞增殖抑制作用的差別不明顯( P > O ．0 5 ) 。本實(shí)驗(yàn)表明，體外合成的c —m y c —s i R N A 對H L 廣6 0 細(xì)胞的增殖抑制作用具有劑量和時(shí)間的依賴性及序列特異性，其作用的最適濃度為1 0 0 l l m o l ／L ，最適時(shí)間為4 8 h 。2 ．c _ I n y c - s i 砌叮A 對H L 一6 0 細(xì)胞c -

5、 m y c m R N A 及C - m y c 蛋白表達(dá)的影響R 1 ：P c R結(jié)果顯示：采用1 0 ，5 0 ，1 0 0 ，2 0 0 砌o l ／L c - m y c ．s i R N A 轉(zhuǎn)染細(xì)胞4 8 h 后，1 0 n m o 以。c —m y c - s i R N A 作用時(shí)目的基因m 對峪的表達(dá)水平開始下調(diào)，以1 0 0 ，2 0 0 I l m o v Lc ．m y c ．s i R N A 作用4 8 h

6、 時(shí)m m 啦表達(dá)水平下調(diào)最明顯( PO ．0 5 ) 。采用1 0 0 n m o l ／L c - m y c ．s i R N A 轉(zhuǎn)染細(xì)胞2 4 h 、4 8 h 、7 2 h 、9 6 h 后，于2 4 h c —m y c - s i R N A 對目的基因m R N A 的表達(dá)水平抑制作用最明顯( PO ．0 5 ) ，但均顯著高于轉(zhuǎn)染組，與轉(zhuǎn)染組相比有顯著性差異( P < 0 ．0 1 ) 。3 ．c - m y