抗髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體生物學(xué)特性研究.pdf

1、多發(fā)性硬化（Multiple Sclerosis，MS）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病，細(xì)胞免疫一直被認(rèn)為在MS的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮主要作用，然而近年來研究顯示體液免疫亦發(fā)揮著重要作用。在諸多髓鞘蛋白中，髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白（MyelinOligodendrocyte Glycoprotein，MOG）是唯一可以在MS的動(dòng)物模型--實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyeliti

2、s，EAE）中同時(shí)誘導(dǎo)出致病性自身抗體與致腦炎T細(xì)胞反應(yīng)的抗原，因而被認(rèn)為是最有研究前景的靶抗原。然而自1999年開始有多項(xiàng)研究表明MS患者血清抗MOG抗體陽性率與健康對(duì)照之間并不存在顯著差異，于是研究者們推測(cè)抗MOG抗體有可能是一組抗體，包括致病性與非致病性兩大類，進(jìn)而研究方向逐漸轉(zhuǎn)向如何鑒別這兩類抗體上。致病性與非致病性抗體是識(shí)別MOG不同表位的，有關(guān)致病性抗體識(shí)別表位的研究有三個(gè)主要方向，包括線性肽段表位、構(gòu)象表位及糖基化表位，其

3、中線性肽段表位研究是目前研究的一個(gè)熱點(diǎn)。有關(guān)特異性線性表位研究在國(guó)外已有較多報(bào)道，但主要集中在EAE模型上，基于MS患者的特異性線性表位研究到目前為止只有三篇，且結(jié)論不一致。在國(guó)內(nèi)，有關(guān)MS患者抗MOG抗體的研究至今還不多，特別是用MOG整蛋白作為抗原檢測(cè)抗體以及有關(guān)抗MOG抗體線性表位特異性方面的研究還是空白。因此檢測(cè)中國(guó)MS患者抗MOG整蛋白抗體并進(jìn)行抗MOG抗體表位特異性的研究，可以將中國(guó)人群的抗MOG抗體在人群中的分布特點(diǎn)與國(guó)外

4、的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，并且填補(bǔ)國(guó)內(nèi)有關(guān)致病性抗MOG抗體線性表位特異性研究的空白。進(jìn)一步認(rèn)識(shí)我國(guó)MS患者的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制，尋找針對(duì)我國(guó)患者早期預(yù)測(cè)疾病進(jìn)展、提示治療效果或評(píng)估預(yù)后的血清學(xué)標(biāo)記物。
　　 目的：
　　 證實(shí)抗MOG抗體在中國(guó)人群中普遍存在，探究中國(guó)多發(fā)性硬化/視神經(jīng)脊髓炎患者抗MOG抗體識(shí)別MOG蛋白的表位特異性。
　　 方法：
　　 1.臨床資料收集：自2009年4月至2010年4月期間，收集在

5、北京協(xié)和醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科門診就診或住院治療的MS/NMO患者67例（包括43例經(jīng)典型多發(fā)性硬化cMS、10例視神經(jīng)脊髓型多發(fā)性硬化OSMS及14例視神經(jīng)脊髓炎NMO），和其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病（Other Non-inflammatory Neurological Diseases，ONND）患者60例，收集健康體檢中心健康對(duì)照77例，將上述3組人群進(jìn)行年齡性別的匹配，入選者簽署知情同意書后采外周血，離心冷凍保存?zhèn)溆谩Ｊ占蠱S/NMO患者詳細(xì)

6、病史、體格檢查及EDSS評(píng)分、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查及治療方案等臨床資料。
　　 2.抗MOG整蛋白抗體檢測(cè)：應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay，EL，ISA）方法，以重組人MOG蛋白胞外段1-125aa為抗原檢測(cè)3組人外周血抗MOG抗體。
　　 3.抗MOG抗體表位特異性檢測(cè)：將MOG蛋白胞外段1～125氨基酸劃分為25個(gè)短肽進(jìn)行人工合成，每個(gè)短肽為12個(gè)氨基酸，相鄰短肽

7、有7個(gè)氨基酸重疊，應(yīng)用ELISA方法，檢測(cè)3組人抗MOG抗體識(shí)別MOG蛋白胞外段的表位特異性
　　 4.分析表位特異性抗MOG抗體與臨床資料之間的關(guān)聯(lián)。
　　 結(jié)果：
　　 1.MS/NMO、ONND及HC三組抗人MOG蛋白胞外段抗體無顯著差異（P>0.05）。cMS、OSMS及NMO三個(gè)疾病亞組抗人MOG蛋白胞外段抗體亦無顯著差異（P>0.05）。
　　 2.抗MOG12～23與抗MOG27～38抗體在

8、MS/NMO患者中顯著升高（P<0.01）。應(yīng)用ROC曲線評(píng)估其臨床診斷價(jià)值顯示，抗MOG27～38抗體較抗MOG12～23抗體具有更好的臨床診斷價(jià)值。
　　 3.抗MOG97～108抗體在ONND組與HC組顯著升高（P<0.01）。
　　 4.抗MOG27～38抗體與臨床資料的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示：發(fā)作期MS/NMO患者抗MOG27～38抗體陽性率顯著高于緩解期患者（P<0.05）；MS/NMO總復(fù)發(fā)次數(shù)較高組（>3次）的

9、抗MOG27～38抗體陽性率顯著高于總復(fù)發(fā)次數(shù)較低組（<3次）（P<0.05）。
　　 5.在11例接受β1b干擾素治療的cMS患者中，抗MOG27～38抗體陽性患者應(yīng)用干擾素治療后復(fù)發(fā)率低于抗MOG27～38抗體陰性患者，但目前例數(shù)較少尚未顯示出顯著差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.抗MOG抗體在不同亞型脫髓鞘疾病患者、非炎性神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者及健康人中廣泛存在。
　　 2.人群外周血中抗MOG抗體存在表位