新型藻藍蛋白-羧甲基殼聚糖納米微球的制備及其對HeLa細胞生長的抑制作用研究.pdf

1、目的：制備新型負載藻藍蛋白（C-phycocyanin，C-PC）的羧甲基殼聚糖（Carboxymethyl chitosan，CMC）納米微球（nanoparticles，NPs），探討藻藍蛋白/羧甲基殼聚糖納米微球（C-PC/CMCNPs）對HeLa細胞生長的影響及分子機制。
　　方法：以CMC和C-PC的質(zhì)量比、CMC濃度、CaCl2濃度為考察因素，利用正交分析方法，通過檢測C-PC/CMCNPs的粒徑和包封率，優(yōu)選C-PC

2、/CMCNPs的制備條件，并在最佳條件下制備 C-PC/CMCNPs。然后將 C-PC、CMC和C-PC/CMCNPs分別作用于HeLa細胞，CCK-8法檢測HeLa細胞的增殖，免疫組化法檢測JNK蛋白的表達情況，免疫熒光法檢測Bcl-2蛋白的表達，Western blotting法檢測Caspase-3蛋白表達的差異，流式細胞術(shù)檢測HeLa細胞的凋亡情況。
　　結(jié)果：篩選出C-PC/CMCNPs的最佳制備條件為CMC與C-PC的

3、質(zhì)量比為1:2，CMC濃度為1 mg/ml，CaCl2濃度為1 mg/ml。最終所制備的C-PC/CMCNPs的平均粒徑為118.4±2.07 nm，并具有較高的包封率（63.2％）；其12 h的累積緩釋率超過60％。C-PC、CMC和C-PC/CMCNPs均能抑制HeLa細胞的增殖，誘導(dǎo)細胞的凋亡，促進促凋亡基因 Caspase-3和JNK的表達，抑制抗凋亡基因 Bcl-2蛋白的表達，其中C-PC/CMCNPs的作用效果最為顯著。