黃芪多糖對宮頸癌Hela細胞生長的抑制作用.pdf

1、目的:
　　宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一。細胞的失控性生長是惡性腫瘤的重要生物學特征之一，手術和放化療的自身缺陷嚴重限制了宮頸癌患者的療效。因此，探索中藥等在宮頸癌治療中應用的可行性具有重要的臨床意義。黃芪是常用的補氣中藥，黃芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）是黃芪的主要活性成分之一。研究發(fā)現(xiàn)，APS可抑制白血病、胃癌、乳腺癌等惡性腫瘤細胞的生長。但尚未見APS對宮頸癌Hela細胞生長的

2、抑制作用及機制的報道。本研究旨在探討APS對宮頸癌Hela細胞生長的抑制作用及相關機制，為APS在宮頸癌治療中的臨床應用提供科學依據(jù)。
　　方法:
　　1.提取APS并定量。
　　2.通過細胞生長曲線觀察APS對宮頸癌Hela細胞的生長速度和倍增時間的影響。
　　3.通過平板克隆形成實驗和流式細胞術觀察APS對宮頸癌Hela細胞的克隆形成能力和細胞周期分布的影響。
　　4.通過Western blottin

3、g方法觀察APS處理前后宮頸癌Hela細胞中細胞周期蛋白A(cyclin A)、cyclin B、cyclin E和p21等細胞生長相關基因表達的變化。
　　結果:
　　1.制備的APS水溶液的濃度為53.623mg/mL。
　　2.細胞生長曲線結果顯示:100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的APS處理的宮頸癌Hela細胞生長速度均明顯慢于未用APS處理的宮頸癌Hela細胞(P＜0.01)，不同濃度AP

4、S處理的宮頸癌Hela細胞的倍增時間顯著長于未用APS處理的宮頸癌Hela細胞（P＜0.01）。
　　綜合考慮100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的APS對宮頸癌Hela細胞的生長均具有抑制作用和細胞狀態(tài)的變化，后續(xù)實驗中，實驗組為200μg/mL的APS誘導48h的宮頸癌Hela細胞，對照組為不加藥的宮頸癌Hela細胞。
　　3.平板克隆形成實驗結果顯示:實驗組宮頸癌Hela細胞的克隆形成均數(shù)顯著低于對照組

5、宮頸癌Hela細胞(P＜0.01)，且克隆體積較小。
　　4.流式細胞術結果顯示:與對照組宮頸癌Hela細胞相比，實驗組宮頸癌Hela細胞的細胞周期出現(xiàn)G1期阻滯(P＜0.01)，同時，S期(P＜0.01)和G2/M期(P＜0.05)細胞減少。
　　5.Western blotting結果顯示:實驗組宮頸癌Hela細胞中cyclin B和cyclin E的表達顯著低于對照組宮頸癌Hela細胞(P＜0.01)，p21的表達顯著