紫外誘變與溫度互作提高酒精酵母高產(chǎn)菌株選育效率及其機理探討.pdf

1、本文主要對釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)菌株Hs25a和Hs27a進行紫外誘變(15w，40cm)處理后，取樣涂平板分組置于25℃、28℃、31℃、34℃、37℃和40℃等6個梯度溫度下培養(yǎng)，獲得了誘變后菌株120株，分析了UV誘變后細胞與培養(yǎng)溫度互作后，各不同溫度下生長所得菌株的酒精發(fā)酵轉(zhuǎn)化率及不同轉(zhuǎn)化率的菌株在其群體中的分布規(guī)律，試圖在篩選獲得高轉(zhuǎn)化率釀酒酵母突變株的同時，建立高效率高產(chǎn)釀酒酵母菌株的選育

2、新方法。結(jié)果如下： 1.致死曲線結(jié)果顯示：同一UV誘變劑量，Hs25a的致死率均相對高于Hs27a，Hs25a是具有凝聚性、交配型為a的單倍體，因此對紫外線的敏感性較強。Hs27a是無凝聚性非整倍體菌株，對紫外線的敏感性較弱。 2.未經(jīng)紫外誘變的釀酒酵母菌株分組置于不同的溫度下培養(yǎng)后，各溫度組菌株的酒精發(fā)酵轉(zhuǎn)化率無顯著組間差異；而紫外誘變后菌株，在六個溫度組篩選所得的誘變株，其組間酒精發(fā)酵相對轉(zhuǎn)化率存在較顯著差異。

3、 3.不同溫度下誘變株的正變百分率的分析結(jié)果顯示：當(dāng)誘變后的培養(yǎng)溫度接近抑制酵母生長的脅迫溫度40℃時，以酒精發(fā)酵成熟醪的酒精度為指標(biāo)，誘變株群體中正變株的百分率有明顯提高：Hs25a從25℃組的7.03％提高到50.19％，Hs27a從25℃組的19.0％提高到47.67％，且兩菌株均在31℃產(chǎn)生了次高的正變株分布值，分別是40.33％和42.15％。 4.最終篩選獲得五株酒精發(fā)酵高產(chǎn)株，與出發(fā)菌株比較，其酒精發(fā)酵的發(fā)酵轉(zhuǎn)化

4、率有一定幅度的提高。 5.建立了UV誘變與溫度互作選育高轉(zhuǎn)化率的釀酒酵母菌株的新方法：對菌株進行70％致死率的紫外誘變后置于40℃或31℃溫度下培養(yǎng)。可較大幅度提高獲得高產(chǎn)菌株的幾率。 本研究發(fā)現(xiàn)，誘變后的釀酒酵母在高溫下培養(yǎng)可提高紫外誘變正向突變率，由此可進一步提高誘變工作的效率，較大幅度地增強了酒精生產(chǎn)酵母在用UV誘變育種中對正突變率的可控性。同時為UV誘變與溫度互作影響酵母有關(guān)基因突變的機制研究探索了新方法和建立了