實時定量PCR監(jiān)測B細胞惡性腫瘤患者造血干細胞移植療效及預(yù)后的研究.pdf

1、目的:評價實時定量PCR(RQ-PCR)技術(shù)檢測IgH水平對B細胞惡性腫瘤患者造血干細胞移植(HSCT)后殘留腫瘤細胞監(jiān)測的意義。 方法:采用家族一致性TaqMan探針聯(lián)合等位基因特異性寡核苷酸(ASO)上游引物技術(shù)檢測22例B細胞惡性腫-瘤患者HSCT前后骨髓單個核細胞的IgH水平動態(tài)變化。IgH的水平以內(nèi)參基因GAPDH進行歸一化。 結(jié)果:1.RQ-PCR實驗可重復(fù)靈敏度為1個拷貝。 2.9例IgH單克隆重排患者HS

2、CT后一個月，骨髓中IgH的拷貝數(shù)較初治時均有明顯的降低(6.67×10<'3>/10<'6>GAPDH 對29/10<'6>GAPDH，n=9，p<0.01)。3例移植后15個月IgH的拷貝數(shù)持續(xù)小于10<'2>/10。GAPDH，18個月后IgH水平為0的患者獲得了完全的臨床和分子遺傳學(xué)緩解(CCyR)；5例移植后3個月以內(nèi)IgH拷貝數(shù)持續(xù)小于10<'2>/10<'6>GAPDH，隨后IgH拷貝數(shù)持續(xù)小于10<'2>/10<'6>G

3、APDI-l的患者臨床獲得完全緩解(CR)。1例患者移植后近3個月時IgH拷貝數(shù)為4.5×10<'2>/10<'6>GAPDH，四個月時臨床復(fù)發(fā)。3.RQ-PCR檢測8例干細胞采集物的腫瘤污染水平為3.68×10<'2>(0-1720)/10<'6>GAPDH，外周血采集物中的腫瘤污染小于骨髓[75(0-890)/10<'6>GAPDH，n=5對1.1×10<'3>(527-1720)/10<'6>GAPDH，n=3，p