實(shí)時(shí)定量PCR監(jiān)測(cè)B細(xì)胞惡性腫瘤患者造血干細(xì)胞移植療效及預(yù)后的研究.pdf

1、目的:評(píng)價(jià)實(shí)時(shí)定量PCR(RQ-PCR)技術(shù)檢測(cè)IgH水平對(duì)B細(xì)胞惡性腫瘤患者造血干細(xì)胞移植(HSCT)后殘留腫瘤細(xì)胞監(jiān)測(cè)的意義。 方法:采用家族一致性TaqMan探針聯(lián)合等位基因特異性寡核苷酸(ASO)上游引物技術(shù)檢測(cè)22例B細(xì)胞惡性腫-瘤患者HSCT前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞的IgH水平動(dòng)態(tài)變化。IgH的水平以內(nèi)參基因GAPDH進(jìn)行歸一化。 結(jié)果:1.RQ-PCR實(shí)驗(yàn)可重復(fù)靈敏度為1個(gè)拷貝。 2.9例IgH單克隆重排患者HS

2、CT后一個(gè)月，骨髓中IgH的拷貝數(shù)較初治時(shí)均有明顯的降低(6.67×10<'3>/10<'6>GAPDH 對(duì)29/10<'6>GAPDH，n=9，p<0.01)。3例移植后15個(gè)月IgH的拷貝數(shù)持續(xù)小于10<'2>/10。GAPDH，18個(gè)月后IgH水平為0的患者獲得了完全的臨床和分子遺傳學(xué)緩解(CCyR)；5例移植后3個(gè)月以內(nèi)IgH拷貝數(shù)持續(xù)小于10<'2>/10<'6>GAPDH，隨后IgH拷貝數(shù)持續(xù)小于10<'2>/10<'6>G

3、APDI-l的患者臨床獲得完全緩解(CR)。1例患者移植后近3個(gè)月時(shí)IgH拷貝數(shù)為4.5×10<'2>/10<'6>GAPDH，四個(gè)月時(shí)臨床復(fù)發(fā)。3.RQ-PCR檢測(cè)8例干細(xì)胞采集物的腫瘤污染水平為3.68×10<'2>(0-1720)/10<'6>GAPDH，外周血采集物中的腫瘤污染小于骨髓[75(0-890)/10<'6>GAPDH，n=5對(duì)1.1×10<'3>(527-1720)/10<'6>GAPDH，n=3，p