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1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文黏蛋白在慢性鼻-鼻竇炎中的表達(dá)及其mRNA表達(dá)機(jī)制的研究姓名:黃雪琨申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師:李源20070421史坐! 登墁主堂堡墮塞 塾堡皂壟堡性£苧型墮i 鍪星基里! ! 墨連! 墮怕塑! 墮2 幾.1 B 上調(diào)人鼻黏膜上皮細(xì)胞黏蛋白m R N A 表達(dá)的研究在培養(yǎng)的第二代人鼻黏膜上皮細(xì)胞加入Ⅱ,1B ( 1 0 n 刪) 刺激2 4 小時(shí)后,采用熒光定量R T - P C R ( F Q
2、- R T —P C R ) 及熒光定量逆轉(zhuǎn)錄巢式P C R( F Q - R T - N P —P C R ) 檢測(cè)人鼻黏膜上皮細(xì)胞中M U C 2 、M U C 5 B 和M U C 5 A C m R N A的定量表達(dá)。3 白三烯受體拮抗劑抑制人鼻黏膜上皮細(xì)胞黏蛋白m R N A 表達(dá)的研究在培養(yǎng)的第二代人鼻黏膜上皮細(xì)胞分別加入幾一1B ( 1 0 I l 咖I ) 、自三烯受體拮抗劑( 1 0 —5 M /I I l l ) 及
3、在Ⅱ,lB ( 1 0 n 倒) 刺激前的8 小時(shí)先加入白三烯受體拮抗劑( 1 0 一‰) 孵育, 2 4 小時(shí)后采用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄P C R ( F Q —R T - P C R ) 及熒光定量逆轉(zhuǎn)錄巢式P C R ( F Q —R T —N P - P C R ) 檢測(cè)人鼻黏膜上皮細(xì)胞中M U C 2 、M U C 5 B 和M U C 5 A C m R N A 的定量表達(dá)。結(jié)果:l 免疫組織化學(xué)染色證實(shí)M U C 2 、M U
4、C 5 B 和M U C 5 A C 在正常篩竇黏膜及C R S 的篩竇黏膜組織中均有表達(dá)。在C R S 中M U C 2 、M U C 5 B 和M U C 5 A C 陽(yáng)性表達(dá)于篩竇黏膜上皮細(xì)胞,且以杯狀細(xì)胞為主;M U C 2 和M U C 5 A C 未表達(dá)黏膜下腺體,而M u C 5 B 表達(dá)于C R S 篩竇黏膜的部分黏膜下腺體。在正常對(duì)照組中,M U C 2 、M u C 5 B 和M u c 5 A c 弱陽(yáng)性表達(dá)于篩竇
5、黏膜上皮細(xì)胞,且以杯狀細(xì)胞為主;M U C 2 、M U C 5 B 和M U C 5 A C 未表達(dá)于黏膜下腺體。M U C 2 在正常對(duì)照組的篩竇黏膜表達(dá)的平均灰度值為1 7 4 .5 2 ±5 .7 1 ,在C R S 的篩竇黏膜表達(dá)的平均灰度值為1 3 5 .8 6 ±2 0 .1 1 。M U C 2 在C R S 的篩竇黏膜中的陽(yáng)性表達(dá)高于正常對(duì)照組的篩竇黏膜,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0 .
6、0 1 ) 。M U C 5 B 在正常對(duì)照組的篩竇黏膜表達(dá)的平均灰度值為1 7 2 .6 7 ±1 2 .7 3 ,在C R S 的篩竇黏膜表達(dá)的平均灰度值為1 4 3 .0 1 ±2 2 .5 0 。M U C 5 B 在C R S 的篩竇黏膜中的陽(yáng)性表達(dá)高于正常對(duì)照組的篩竇黏膜,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O .0 1 ) 。M U C 5 A C 在正常對(duì)照組的篩竇黏膜表達(dá)的平均灰度值為1 5 9
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