喉咽癌細胞5-氟尿嘧啶耐藥篩選前后P-170、LRP、TOPOⅡ的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：建立人喉咽癌Hep-2/5-Fu多藥耐藥細胞株，以進一步研究喉口岡部腫瘤MDR的機制。 方法：采用體外藥物濃度梯度遞增的誘導(dǎo)方法建立5-Fu獲得Hep-2/5-Fu多藥耐藥細胞株。采用MTT法檢測Hep-2細胞和Hep-2/5-Fu耐藥細胞株的IC50，并計算其耐藥指數(shù)。觀察其細胞形態(tài)學、生長曲線、倍增時間。細胞免疫組化、逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測P糖蛋白(P-170)、肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)、拓撲異

2、構(gòu)酶II(TopoII)及其mRNA在Hep-2和Hep-2/5-Fu細胞內(nèi)的表達。 結(jié)果：親本細胞Hep-2經(jīng)5-Fu耐藥篩選2個月后成功建立人喉咽癌Hep-2/5-Fu多藥耐藥細胞株模型。體外培養(yǎng)見細胞趨向群集性生長，耐藥細胞株倍增時間較親本細胞株長。由MTT法測得其5-Fu的IC50為由篩選前的2ug/ml上升到約60ug/ml。免疫組化和RT-PCR檢測耐藥細胞P-170、LRP表達量較親本細胞明顯增強，而耐藥細胞Top

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