沙地云杉體細胞胚胎發(fā)生過程中多胺作用機理的研究.pdf

1、論文以沙地云杉成熟合子胚為材料，研究了沙地云杉體細胞胚胎發(fā)生過程中的生理生化變化，著重探討了多胺在體胚發(fā)生中的作用機理。 1.首先對沙地云杉體細胞胚發(fā)生系統(tǒng)的優(yōu)化培養(yǎng)條件進行了研究表明：誘導(dǎo)初始愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為：SH +2，4-D(0.1 mg/L)+6-BA(0.1mg/L)；分化胚性愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為；LS+ABA(5.0mg/L)+PEG4000(50.0g/L)加入50.0g/LPEG4000可改善胚性愈傷組織

2、的質(zhì)量，誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織黃綠色、色澤亮麗、松散、顆粒狀、大小均勻一致。胚性愈傷組織誘導(dǎo)周期為60d，第50d左右需繼代擴繁。 2.沙地云杉胚性愈傷組織體細胞胚胎發(fā)生過程中，SOD酶活性較高，而POD活性較低。附加外源Put促進體細胞胚發(fā)生過程中POD酶活性上升，SOD酶活性降低。附加多胺抑制劑時魚雷胚時期的SOD酶活性較高，隨著胚的成熟SOD酶活性逐漸下降，而POD酶活性一直保持上升狀態(tài)。 3.體細胞胚胎發(fā)生初期(多

3、細胞原胚時期)及成熟階段(球形胚、心形胚、魚雷胚及子葉胚時期)內(nèi)源PA含量不同；附加30mg/L的外源Put可以提高內(nèi)源PA的含量，促進球形胚的發(fā)生。特別是對內(nèi)源Put和Spin的影響較大。附加外源Put后球形胚時期內(nèi)源PA含量明顯增加，但體細胞胚成熟階段內(nèi)源PA含量下降。維持較高水平的Put/Spd和Put/Spm是細胞柄團前期發(fā)育所需要的，但不利于體細胞胚成熟。 4.CHA和MGBG 2種抑制劑處理的結(jié)果基本相似。單獨附加加