體外激活的調節(jié)性T細胞趨化特性初探.pdf

1、目的:體外動態(tài)觀察被激活的調節(jié)性T細胞趨化特性，為利用調節(jié)性T細胞誘導免疫耐受提供線索。 方法:1．分離純化人外周血調節(jié)性T細胞：分離正常健康人外周血單個核細胞；加免疫磁珠富集CD4<'+>T細胞；加FITC標記CD4抗體，APC標記的CD25抗體，PE標記CD127抗體上流式細胞儀分選出CD4hiCD127loCD25hi-int細胞即調節(jié)性T細胞并分析其純度和活率；2．調節(jié)性T細胞趨化特性觀察：純化的調節(jié)性T細胞與CD4<'

2、+>CD25-T分別用ConA(10 ug/ml)刺激0h、24h，48h后，用趨化因子CCL1，CCL5，CCL20，CCL22做趨化實驗，觀察各趨化因子對調節(jié)性T細胞與CD4<'+>CD25-T細胞趨化作用。 結果:分離得到的調節(jié)性T細胞純度為97.4％，活細胞率為95％。得率：4.1％。CCL1，CCL20，CCL22均可趨化調節(jié)性T細胞，且在細胞活化后趨化效率隨時間而改變。CCL1對調節(jié)性T細胞的趨化指數(shù)較高而對CD4<

3、'+>CD25-T細胞趨化性很弱：CCL22對調節(jié)性T細胞和CD4<'+>CD25-T細胞趨化指數(shù)都較高，但對調節(jié)性T細胞趨化作用更強：CCL20對調節(jié)性T細胞和CD4<'+>CD25-T細胞趨化指數(shù)都很高；CCL5對調節(jié)性T細胞趨化性較弱。 結論:1．磁珠陰性分選結合流式細胞儀技術可分選出較高純度及活率的調節(jié)性T細胞。 2．與CD4<'+>CD25T細胞相比CCL1對調節(jié)性T細胞的趨化作用較特異，CCL22趨化作用較強