Bystin在反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)及其功能研究.pdf

1、已知bystin在早期胚胎著床過(guò)程中，通過(guò)與trophinin以及tastin形成一個(gè)復(fù)合物介導(dǎo)滋養(yǎng)層細(xì)胞以及子宮內(nèi)膜細(xì)胞之間的黏附。然而，我們發(fā)現(xiàn)bystin在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá)并且在6-OHDA損傷一側(cè)大鼠黑質(zhì)紋狀體投射以及大腦皮層機(jī)械損傷模型大鼠中bystin表達(dá)水平顯著上調(diào)，而且bystin主要在反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)。在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞中，促炎癥因子脂多糖，腦損傷后釋放的神經(jīng)生長(zhǎng)因子以及白細(xì)胞介素-1β均能引起bysti

2、n的表達(dá)上調(diào)，并且細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的上升也是導(dǎo)致bystin表達(dá)上調(diào)的一個(gè)重要因素。 通過(guò)對(duì)腦損傷后bystin的時(shí)空表達(dá)模式的觀察，我們發(fā)現(xiàn)bystin陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞在腦損傷近處逐漸增多并向損傷處聚集，提示bystin可能參與反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移過(guò)程。siRNA介導(dǎo)bystin表達(dá)下降后，體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞在穿孔實(shí)驗(yàn)以及劃痕引起的遷移過(guò)程均受到明顯抑制，并且可能是通過(guò)抑制細(xì)胞片狀偽足的伸出而導(dǎo)致對(duì)細(xì)胞遷移的抑制。我

3、們發(fā)現(xiàn)正在遷移的星形膠質(zhì)細(xì)胞中，bystin在片狀偽足的頂端邊緣與F-actin共定位，通過(guò)熒光能量共振轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示它們?cè)诖颂幹苯咏Y(jié)合。在正常星形膠質(zhì)細(xì)胞中bystin定位于應(yīng)力纖維上，在受到db-cAMP或細(xì)胞松弛素B等刺激后，bystin與F-actin發(fā)生一致的細(xì)胞亞定位變化。體外共沉降實(shí)驗(yàn)也表明bystin與F-actin能直接結(jié)合，而且其結(jié)合可能是通過(guò)bystin中問(wèn)段(134-256 aa)以及羧基端(257-436 a

4、a)所介導(dǎo)。而bystin在星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)受到抑制導(dǎo)致了應(yīng)力纖維的解聚并且在受到db-cAMP刺激后細(xì)胞更加易于發(fā)生星形化，表明在這些細(xì)胞中F-actin更加容易發(fā)生解聚，所以bystin可能起著穩(wěn)定F-actin的作用。在組成性激活突變型Racl轉(zhuǎn)染后的星形膠質(zhì)細(xì)胞中，bystin被募集至應(yīng)力纖維上，說(shuō)明bystin與F-actin之間的相互作用受到Rac 1的調(diào)節(jié)。上述結(jié)果提示，bystin在星形膠質(zhì)細(xì)胞中受Racl調(diào)節(jié)并與F