灰樹花糖蛋白GF6F2的結(jié)構(gòu)及其理化性質(zhì)研究.pdf

1、灰樹花(Grifola frondosa)是一種名貴的食用、藥用真菌，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗腫瘤等多種生物活性，其中，灰樹花多糖為其最主要的一類生物活性成分。目前，發(fā)酵工程技術(shù)已對(duì)灰樹花進(jìn)行大規(guī)模發(fā)酵，使灰樹花發(fā)酵菌絲體成為灰樹花多糖的主要來源。 本文以灰樹花發(fā)酵菌絲體為原料，經(jīng)過一系列脫脂、水提及堿提等工藝，得到一種熱堿提水溶粗多糖組分GF6(得率6.8％)。GF6經(jīng)過離子交換及凝膠排阻層析分離純化得到一種含有少量蛋白質(zhì)的多糖G

2、F6F2(得率2.4％)。在應(yīng)用薄層色譜(TLC)、氣相色譜(GC)、紅外光譜(IR)、紫外光譜(UV)、核磁共振波譜(NMR)等化學(xué)及儀器分析方法得到其初步結(jié)構(gòu)信息的基礎(chǔ)之上，本文又利用了高碘酸(HIO<,4>)氧化、Smith降解、甲基化反應(yīng)、乙酰解反應(yīng)、酸解反應(yīng)等化學(xué)方法和高效液相色譜法(HPLC)、氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、電噴霧質(zhì)譜(ESI/MS)、1D，2D-NMR等儀器分析方法對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了深入的研究。推斷多糖GF6F2分子

3、量為187kD，屬于復(fù)雜的多分支的β-1.3-/β-1.6-葡聚糖。GF6F2糖鏈部分以β-1，3-Glc為主鏈，β-1，6-GIc為分支的結(jié)構(gòu)，β-1.6-Glc含量較大。GF6F2酸解產(chǎn)物AHFl為其相對(duì)簡(jiǎn)單的主鏈結(jié)構(gòu)，其亦為β-1,3-GIc為主鏈，β-1，6-Glc為分支的結(jié)構(gòu)，兩者比例約為5：4。應(yīng)用SDS-PAGE對(duì)GF6F2蛋白部分的研究，證明GF6F2中含有兩條游離蛋白，分子量約在42.7kD～31kD之間，另少部分蛋白