灰樹花糖蛋白GF6F2的結構及其理化性質研究.pdf

1、灰樹花(Grifola frondosa)是一種名貴的食用、藥用真菌，具有增強機體免疫、抗腫瘤等多種生物活性，其中，灰樹花多糖為其最主要的一類生物活性成分。目前，發(fā)酵工程技術已對灰樹花進行大規(guī)模發(fā)酵，使灰樹花發(fā)酵菌絲體成為灰樹花多糖的主要來源。 本文以灰樹花發(fā)酵菌絲體為原料，經過一系列脫脂、水提及堿提等工藝，得到一種熱堿提水溶粗多糖組分GF6(得率6.8％)。GF6經過離子交換及凝膠排阻層析分離純化得到一種含有少量蛋白質的多糖G

2、F6F2(得率2.4％)。在應用薄層色譜(TLC)、氣相色譜(GC)、紅外光譜(IR)、紫外光譜(UV)、核磁共振波譜(NMR)等化學及儀器分析方法得到其初步結構信息的基礎之上，本文又利用了高碘酸(HIO<,4>)氧化、Smith降解、甲基化反應、乙酰解反應、酸解反應等化學方法和高效液相色譜法(HPLC)、氣質聯(lián)用(GC-MS)、電噴霧質譜(ESI/MS)、1D，2D-NMR等儀器分析方法對其結構進行了深入的研究。推斷多糖GF6F2分子

3、量為187kD，屬于復雜的多分支的β-1.3-/β-1.6-葡聚糖。GF6F2糖鏈部分以β-1，3-Glc為主鏈，β-1，6-GIc為分支的結構，β-1.6-Glc含量較大。GF6F2酸解產物AHFl為其相對簡單的主鏈結構，其亦為β-1,3-GIc為主鏈，β-1，6-Glc為分支的結構，兩者比例約為5：4。應用SDS-PAGE對GF6F2蛋白部分的研究，證明GF6F2中含有兩條游離蛋白，分子量約在42.7kD～31kD之間，另少部分蛋白