菲律賓蛤仔糖蛋白的分離純化、理化性質(zhì)及生理活性的初步研究.pdf

1、目的：通過對菲律賓蛤仔GP結構與性質(zhì)的研究，為其抗腫瘤作用機理的研究提供一定的基礎數(shù)據(jù)，并綜合利用貝類資源為研究新型的功能性食品提供理論基礎。本文以菲律賓蛤仔全臟器為原料，對其糖蛋白進行了初步研究，探討了菲律賓蛤仔糖蛋白的制備工藝 ，并對其組成生理活性進行了研究。菲律賓蛤仔全臟器經(jīng)熱水煮提、透析、冷凍干燥得到菲律賓蛤仔糖蛋白粗品，粗品經(jīng)DEAE-52-纖維素、Sephadex-G100柱層析分離純化，并經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳對純化所得的級

2、分進行分析來鑒定其相對純度較高。 采用改良的MTT法檢測菲律賓蛤仔糖蛋白對體外腫瘤細胞的抑制作用和對細胞免疫功能的影響。采用HPLC對純化的級分進行了單糖組分檢測，改良的苯酚-硫酸法和Folin-酚法測總糖、總蛋白質(zhì)的含量，IR確定其特征基團，SDS-PAGE法測定其相對分子質(zhì)量。 結果與結論：⒈本文首次以菲律賓蛤仔全臟器為原料分離提取出菲律賓蛤仔糖蛋白，菲律賓蛤仔糖蛋白經(jīng)DEAE-52-纖維素、Sephadex-G10

3、0柱層析分離純化可得二個主要組分：中性糖蛋白GP-1，酸性糖蛋白GP-2，經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分析表明其相對純度較高。 2. GP-1相對分子質(zhì)量為35000Da，總糖含量60.5％，蛋白含量18.2％，HPLC糖組成分析表明其糖鏈部分主要是由木糖、葡萄糖、半乳糖組成，IR分析表明其含有多糖的-OH，-COO-1，-NH，-C-O-C等特征基團。 3.GP-2相對分子質(zhì)量為43000Da，總糖含量57.4％,蛋白含量22