致敏大鼠氣道粘液異常分泌與EGFR通路及其藥物治療.pdf

1、目的：探討致敏大鼠粘液高分泌狀態(tài)的產(chǎn)生與轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)、生長因子受體(EGFR)通路之間的關(guān)系以及EGFR通路阻斷劑，即酪氨酸激酶抑制劑Genistein的治療作用。 方法：應(yīng)用析因設(shè)計方法，所有實驗動物接受兩種因素的處理：M因素有三個水平，分別為生理鹽水、哮喘及Genistein治療；T因素以首次激發(fā)時間為0點(diǎn)，分別為激發(fā)后1d、3d、7d、15d四個水平。按照完全隨機(jī)分組的方法，將48只實驗大鼠分為12個組，每

2、組4只。病理切片行HE染色和AB-PAS染色，測定杯狀細(xì)胞化生/增生(GCH/M)指數(shù)(每毫米支氣管上皮中杯狀細(xì)胞數(shù)目)；免疫組化半定量檢測支氣管上皮細(xì)胞MUC5AC蛋白和EGFR蛋白表達(dá)水平；放射免疫方法檢測血清中TGF-α。 結(jié)果：(1)大鼠氣道病理改變哮喘組氣道上皮杯狀細(xì)胞增生肥大，并有大量粘液形成，部分小氣道有粘液栓形成。在生理鹽水組和治療組沒有發(fā)現(xiàn)氣道粘液栓，氣道腔里有少量粘液。(2)哮喘組大鼠與生理鹽水組大鼠相比，M

3、UC5AC蛋白表達(dá)和GCH指數(shù)明顯增高，隨著激發(fā)時間的不同，呈動態(tài)變化。(3)析因分析結(jié)果表明，M因素主效應(yīng)：造模方式不同MUC5AC蛋白表達(dá)和GCH/M指數(shù)有顯著性差異(F=10.41P＜0.01；F=3388.49P＜0.01)，EGFR蛋白表達(dá)和血清TGF-α水平有顯著性差異(F=610.85P＜0.01；F=57.54P＜0.01)。交互作用：鹽水組各時間點(diǎn)MUC5AC蛋白表達(dá)、GCH/M指數(shù)、EGFR表達(dá)和血清TGF-α均無差

4、異(F=3.05，0.92，0.16，0.41；P＞0.05)，哮喘和治療組隨各激發(fā)時間點(diǎn)不同MUC5AC蛋白表達(dá)和GCH/M指數(shù)有差異(F=2.17，993.53；P＜0.01)(F=0.23P＜0.01；F=96.30P＜0.05)，EGFR表達(dá)和血清TGF-α水平也有差異(F=127.36，10.84；P＜0.01)(F=23.59P＜0.01；F=3.70P＜0.05)。組間比較：MUC5AC的表達(dá)在7d水平哮喘組和鹽水組之間的

5、差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.68P＜0.01)，15d水平哮喘組和鹽水組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.54P＜0.01)；7d和15d水平，治療組和鹽水組之間無顯著性差異(t=0.83，0.94；P=0.41，0.35)。(4)在哮喘組MUC5AC的表達(dá)和GCH/M指數(shù)之間呈正相關(guān)(r=0.983p＜0.01)；EGFR表達(dá)和血清TGF-α之間呈正相關(guān)(r=0.910p＜0.01)；MUC5AC和EGFR的表達(dá)之間呈正相關(guān)(r=0.94